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标题:[求助]关于K562细胞贴壁的问题

bs4665[使用道具]
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发表于 2012-9-5 12:27 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]关于K562细胞贴壁的问题


各位：
K562细胞是半贴壁细胞，培养时间长的情况下，是否会贴壁的较悬浮的多，还是因为其他原因引起细胞贴壁较多。另外，培养瓶底有较多的细胞碎片，请问怎么能完全消除。请各位帮我分析一下！谢谢！
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mickeylin[使用道具]
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发表于 2012-9-5 12:27 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

这是没有关系的,我的细胞也会出现这种现象,不过轻轻吹打,细胞就会下来啦.细胞碎片可以通过小转速离心的方法去除
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vera+[使用道具]
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发表于 2012-9-5 12:27 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

K562细胞在培养时间较长的情况下，会出现贴壁细胞较多的现象是正常的，这是细胞对于环境的一种适应，当然对于我们实验是不利的，所以，应该尽可能的避免这种情况发生，在培养一定时间后，应当传代。
培养瓶的细胞碎片可以在传代时利用低转速离心的方法去除。
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wood533[使用道具]
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发表于 2012-9-5 12:28 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

请问小转速离心指的离心速度在多少范围?是细胞碎片被沉淀下来吗?但我的细胞碎片很难吹打下来,需要用胰酶消化吗?
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S6044[使用道具]
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发表于 2012-9-5 12:28 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

个人认为:既然细胞碎片很难被吹打下来那就稍微吹打,只将细胞吹打下来,碎片不要,换瓶培养,吹打下来的细胞1000转(该转速下不会对细胞造成损伤),离心五分钟,细胞被沉淀下来,转到新瓶正常培养即可.我以前养过K562就是这么做的,细胞状态还不错. *@*!
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发表于 2012-9-5 12:29 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我也养的是k562，在细胞状态好的时候，还是贴壁的多些。而且很容易就吹下来了，但k562的细胞碎片不是很多，除非一个培养瓶用了很长时间。我一般用800转，离心5分，也用过600转，效果也不错的。吹打时要小心，不能太激烈，否则细胞会破给你看，碎片一大堆。
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发表于 2012-9-5 12:29 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

现在我的细胞不仅贴壁，而且出现了许多小的就像细胞质碎片一样的东西，我不知道到底是什么？现传一张图片，谢谢大家帮我分析一下！
急！
谢谢！


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2012-9-5 12:29
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发表于 2012-9-5 12:30 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
部分细胞已经发生凋亡，可能是你传代不及时造成的，500转离心，洗涤一下，记住勤换液
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bs4665[使用道具]
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发表于 2012-9-5 12:30 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

你所指的部分细胞已经凋亡，是指的那些底层较小的碎片吗？
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bs4665[使用道具]
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发表于 2012-9-5 12:32 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我用胰酶消化20min,细胞脱壁，而细胞碎片样的东东仍无法消化下来。
能帮我分析一下吗？
如果怀疑微生物污染，应该考虑用什么染色方法鉴定？
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