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标题:[求助]乳鼠心肌如何消化才好

剪刀手520[使用道具]
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[求助]乳鼠心肌如何消化才好

近几次用0.125%胰酶消化乳鼠心肌细胞,但每次消化后,消化液很粘稠,很难吸吸出,勉强能吸出一点,请教各位大侠如何解决?

谢谢
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lixi559[使用道具]
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你有没有过滤的啊
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pencil菲[使用道具]
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很多战友用热消化都碰到同样的问题,建议改用冷消化,浓度0.06%胰酶。
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greenbee[使用道具]
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【1】过滤了阿
【2】如何进行冷消化啊?
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bohe221[使用道具]
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很粘稠是因为消化过程中,胶原物质释放出来。不过我做过很多次,只要胰酶多加点,就没事。
一般我在液闪瓶(含1个小磁棒)中加入5ml胰酶,37度磁力搅拌器上搅拌10分钟后(先准备一个烧杯中加入水,水温加热到37度后将液闪瓶放在水中,烧杯放在搅拌器上),将消化液体吸到10ml的试管中(试管事先加入了5ml培养基)。然后再加入5ml胰酶消化,如此重复,7-8次就差不多了(我消化的10只出生2天乳鼠的心脏),越到后面,越不粘稠了。最后,离心重悬细胞。当然整个过程需要无菌操作。
至于冷消化,我没有听说过,但是我想时间会大大延长。
不知道解决了你的问题没有。
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greenbee[使用道具]
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【1】请问楼上师兄磁力搅拌时,搅拌频率多少?
【2】10只乳鼠大概能消化出多少细胞,即 多少×10的8次方?或接种多少个6孔板?
【3】你用的胰酶浓度多少?
【4】心肌细胞接种后多长时间搏动?
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toy[使用道具]
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【1】请问楼上师兄磁力搅拌时,搅拌频率多少?
【2】10只乳鼠大概能消化出多少细胞,即 多少×10的8次方?或接种多少个6孔板?
【3】你用的胰酶浓度多少?
【4】心肌细胞接种后多长时间搏动?

——————————————————————————————

【1】具体多少我不知道,只要动就可以了,速度不是很快。
【2】平均1只乳鼠大概5×10的5次方
【3】同你的一样
【4】心肌细胞接种后12小时左右搏动
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阿司匹林[使用道具]
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可能和胰酶有关系
我的一个师姐出现过同样的问题,但换用Hyclone的胰酶后就好了。
你可以试试。
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greenbee[使用道具]
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请问师兄,用的哪个公司胰酶?
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ffooll[使用道具]
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你用的是哪个公司的胰酶?是液态的,还是粉末的?
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