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标题:[求助]请教以下照片里的细胞都是些啥污染！

tudou85[使用道具]
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发表于 2012-9-8 16:12 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]请教以下照片里的细胞都是些啥污染！


3T3细胞前几次传代都不错！上次传之后就发现DMEM培养基里有许多长条状的麦叶一样的可随培养基漂动的黄色物质，换液后今天发现这种物质越来越多，同时细胞生长不如以前，于是就观察了培养基，发现里面有些异物，本科技术员认为是培养基结晶，就将培养基孵育在37度1小时再观察，发现异物有增多的倾向。请大家帮忙分析一下！！
以下是细胞培养液中的杆状异物 *100倍


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发表于 2012-9-8 16:12 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

200倍


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发表于 2012-9-8 16:13 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

400倍


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发表于 2012-9-8 16:14 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

这是培养液中的物质


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发表于 2012-9-8 16:15 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

这是将培养基置于37度孵育1小时后的照片


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发表于 2012-9-8 16:43 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

前面3幅图看起来不太象是污染，象是一些脏东西，你确定是这些东东在增多吗？
第四，五幅图中的培养基有没有加过血清？看起来也不太象污染，象是血清里的絮状沉淀。
一家之言，仅供参考
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tudou85[使用道具]
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发表于 2012-9-8 16:44 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

感觉上是在增多，没有记过数，后两幅图中的培养基没有加血清，是过滤分装后保存于-20度刚解冻的DMEM，至今14天，而且同一批分装未冻存的培养基都没有这种分叉状的物质。
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发表于 2012-9-8 16:44 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

又仔细看了看，感觉前面3幅图还是不太象污染，但搞不懂脏东西哪里来的，我做原代的时候常常出现这种东东。四，五幅图中的分叉状的物质你再观察一下8，看培养液有没有浑掉。感觉确实不太象污染。
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发表于 2012-9-8 16:45 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

最后一张照片很像是细胞死后的碎片。我曾经观察到过。
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tudou85[使用道具]
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 小中大

今天观察结果：前三幅图片中的黄色杆状物质没有减少，也没有增多；后两幅图中的DMEM空白培养基（青链霉素已加，未加血清）过夜后分叉状物质消失了。据此我们推测这种分叉样的物质是培养基冻存在-20度后解冻时产生的结晶。
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