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标题:[求助]该配多少的浓度？

BUK[使用道具]
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发表于 2012-9-9 10:03 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]该配多少的浓度？


我用药物干预细胞，文献上是说10uM的干预浓度。我该怎么配干预药物的浓度呢？我用20mg+5mlDMSO+95ml液体，这样配合适吗？药物的分子量是400道尔顿，我用96孔培养，每孔200ul，该放多少呢？真的算糊涂了，希望热心人帮忙看看。
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abc816[使用道具]
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发表于 2012-9-9 10:03 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

按偶们实验室的标准：文献上写的浓度是指加药到96孔板后的终浓度。

所以你配浓度的时候要配比终浓度大的原浓度。

偶们的做法是：96孔培养，每孔200ul细胞悬液，20ul药物。——这样药物浓度就稀释了11倍。也就是说，你配的时候要在终浓度的基础上乘11是你所配的浓度。

举例：终浓度是10，那么加到96孔板之前的浓度应该是110，终浓度是20，你加到96孔板之前（也即你配的浓度）的浓度是220，以此类推哦！

当然，为了稀释，一般配原液，根据需要稀释就可以了。
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西子[使用道具]
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 小中大

很多化合物是只溶于DMSO的。而DMSO浓度超过1/1000可能对细胞产生毒副作用。
通用的方法应该是配置1000x的stock solution（如果终浓度10um就配成10mM）。比如200ul的孔加0.2ul你配好的10mM stock solution.
这也是基于细胞水平药物高通量筛选过程中的基本常识。
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BUK[使用道具]
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发表于 2012-9-9 10:04 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
还有一问题，我在用配DMSO药物后，用培养液稀释，发现溶液浑浊，可是滤器过滤后却清亮了，会不会把药物给过滤了呀？
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yes4[使用道具]
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 小中大

一般加入药物的体积和加入细胞的体积是否有关系？100ul的细胞，应该加入多少的药物？如果做单独用药与联合用药的比较，是否无论是单独加药还是联合加药，都要加入相同体积的药物？
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wu11998866[使用道具]
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发表于 2012-9-9 10:05 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我开始用ＤＭＳＯ溶解药物时也是这样的，开始还好好的，可一用培养液稀释，溶液就混浊了。用滤器过滤结果就把药物颗粒也过滤掉了。后来我就降低了药物浓度，先用终浓度小于或等于０．１％的ＤＭＳＯ溶解，再加入培养液稀释就变得澄清了，过滤也不怕把有效成分滤掉了。你也试试？
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BUK[使用道具]
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发表于 2012-9-9 10:07 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

请问“终浓度小于或等于０．１％的ＤＭＳＯ溶解” 是指先把DMSO用培养液稀释，然后再溶解吗？
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mimili_901[使用道具]
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 小中大
请问“终浓度小于或等于０．１％的ＤＭＳＯ溶解” 是指先把DMSO用培养液稀释，然后再溶解吗？

————————————————————————————————————————

不是。是把药物溶解到DMSO中，但DMSO 最终在培养基中的体积不要超过0.1%
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BUK[使用道具]
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 小中大

我是这样啊，可是在过滤前还是出现浑浊啊
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mimili_901[使用道具]
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发表于 2012-9-9 10:08 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

可能与你的药物的浓度、纯度和温度有关。
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