细胞世界 » 讨论区 » 经验共享 » [求助]如何用载玻片让培养的细胞爬片?

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴

标题:[求助]如何用载玻片让培养的细胞爬片?

二丫头466[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 74070
精华 0
积分 266
帖子 272
信誉分 100
可用分 2101
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-4
状态 离线
1
 

[求助]如何用载玻片让培养的细胞爬片?

各位前辈,晚辈培养原代细胞,需要做鉴定,所以要爬片,原打算用盖玻片,但病理科说那样不好操作,要改成载玻片,那么厚的东西,细胞怎么往上爬?有什么需要特殊注意的地方吗?有什么窍门吗?请各位前辈不吝赐教!深表感谢!
顶部
laughing妹[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 77381
精华 0
积分 188
帖子 115
信誉分 100
可用分 1336
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-16
状态 离线
2
 

我们做细胞爬片都是用载玻片的,一般用24孔板,每孔放一片,(把载玻片预先切好,泡酸过夜,自来水冲洗20遍,去离子水3遍,双蒸水3遍,高压消毒)用眼科镊夹取,小心操作,还是可以的.如果细胞不好贴壁可以涂点多聚赖氨酸.我们一直都是这么做的,效果还可以.你不妨试试.祝取的成功!
顶部
二丫头466[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 74070
精华 0
积分 266
帖子 272
信誉分 100
可用分 2101
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-4
状态 离线
3
 

晕!载玻片怎么放在24孔板里?请教啊!不过有人说涂明胶,聚赖氨酸怎么个突发?
多谢!
顶部
TAT[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 74236
精华 0
积分 507
帖子 694
信誉分 100
可用分 4298
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-8
状态 离线
4
 

晕!载玻片怎么放在24孔板里?请教啊!不过有人说涂明胶,聚赖氨酸怎么个突发?
多谢!
顶部
bohe221[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 74583
精华 0
积分 419
帖子 457
信誉分 100
可用分 3228
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-12
状态 离线
5
 
我们做细胞爬片都是用载玻片的,一般用24孔板,每孔放一片,(把载玻片预先切好,泡酸过夜,自来水冲洗20遍,去离子水3遍,双蒸水3遍,高压消毒)用眼科镊夹取,小心操作,还是可以的.如果细胞不好贴壁可以涂点多聚赖氨酸.我们一直都是这么做的,效果还可以.你不妨试试.祝取的成功!

————————————————————

此处的载玻片应为盖玻片。
顶部
laughing妹[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 77381
精华 0
积分 188
帖子 115
信誉分 100
可用分 1336
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-16
状态 离线
6
 
谢谢,应该为盖玻片.笔误,不好意思.
顶部
kuaizige[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76978
精华 1
积分 526
帖子 707
信誉分 102
可用分 4338
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-11-11
状态 离线
7
 

我以前也用盖玻片的,效果还可以啊,我没有涂多聚赖氨酸,细胞消化后直接接种到盖玻片上,放置一两天就可以长满了,当然盖玻片要先泡酸。染色时先固定就可以了。
顶部
kuaizige[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76978
精华 1
积分 526
帖子 707
信誉分 102
可用分 4338
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-11-11
状态 离线
8
 

补充一下,盖玻片是放到6孔培养板里的,接种后要小心轻放,尽量不要晃动。
顶部
zsxan1990[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 76272
精华 0
积分 442
帖子 604
信誉分 100
可用分 3776
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-3
状态 离线
9
 

载玻片爬片一样好的,片子放平皿里,先滴上0.1%明胶或胶原,1小时后吸去,接种细胞,观察细胞贴壁后加足量培养液
顶部
二丫头466[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 74070
精华 0
积分 266
帖子 272
信誉分 100
可用分 2101
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-4
状态 离线
10
 

两天前用盖玻片试着爬以下,做了HE染色效果还不错,可以后打算做免疫组化的,因为不是自己做,由病理科给做,人家说盖玻片不好操作,易碎,所以建议用载玻片,如果用明胶或聚赖氨酸预先处理玻片,在做免疫组化的时候不会影响结果吗?请各位前辈赐教!
顶部