【讨论帖】大家谈谈细胞经液氮冻存1年后再复苏时细胞的...

细胞世界 » 讨论区 » 经验共享 » 【讨论帖】大家谈谈细胞经液氮冻存1年后再复苏时细胞的...

12 1/2 1 2 ››

需要登录并加入本群才可以回复和发新贴

打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:【讨论帖】大家谈谈细胞经液氮冻存1年后再复苏时细胞的...

乌贼老弟[使用道具]
三级
Rank: 3

UID 74586
精华 0
积分 336
帖子 411
信誉分 100
可用分 2791
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-12
状态离线

发表于 2012-9-9 12:56 资料个人空间短消息加为好友

小中大

如题，希望此版块中细胞高手和大家一起分享你们宝贵的经验成果。恳请发言！

skytree[使用道具]
三级
Rank: 3

UID 76459
精华 0
积分 372
帖子 444
信誉分 100
可用分 3026
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-5
状态离线

发表于 2012-9-9 12:57 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我复苏过冻了2-3年的非肿瘤细胞，感觉没什么

主要与冻存时细胞的状态以及冻存、复苏操作等有关。

bohe221[使用道具]
三级
Rank: 3

UID 74583
精华 0
积分 419
帖子 457
信誉分 100
可用分 3228
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-12
状态离线

发表于 2012-9-9 12:58 资料个人空间短消息加为好友

小中大

本人从事细胞培养已六年：肿瘤细胞及细胞株冻存1年以上，复苏后存活率95%以上；原代分离的内皮细胞和平滑肌细胞冻存一年左右复苏后存活率在90%以上，冻存和复苏的过程很重要。干细胞冻存后再复苏，细胞很快就会分化。

乌贼老弟[使用道具]
三级
Rank: 3

UID 74586
精华 0
积分 336
帖子 411
信誉分 100
可用分 2791
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-12
状态离线

发表于 2012-9-9 12:58 资料个人空间短消息加为好友

小中大

本人从事细胞培养已六年：肿瘤细胞及细胞株冻存1年以上，复苏后存活率95%以上；原代分离的内皮细胞和平滑肌细胞冻存一年左右复苏后存活率在90%以上，冻存和复苏的过程很重要。干细胞冻存后再复苏，细胞很快就会分化。

——————————————————————————————————————————————————————————————

谢谢你和大家分享他的宝贵经验。本人培养的hMSCs经液氮冻存后复苏，台盼蓝染色检测活力只有80％左右。结果差强人意！郁闷。
不知现在你有没有关于细胞冻存一年以上时间后复苏，细胞活力可达90％以上的参考文献，有的话请发给我，多谢惠助！

tangxin_80[使用道具]
四级
Rank: 4

UID 79896
精华 0
积分 549
帖子 757
信誉分 100
可用分 4621
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-17
状态离线

发表于 2012-9-9 12:59 资料个人空间短消息加为好友

小中大

QUOTE:

原帖由 乌贼老弟 于 2012-9-9 12:58 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
本人从事细胞培养已六年：肿瘤细胞及细胞株冻存1年以上，复苏后存活率95%以上；原代分离的内皮细胞和平滑肌细胞冻存一年左右复苏后存活率在90%以上，冻存和复苏的过程很重要。干细胞冻存后再复苏，细胞很快就会分化。

——— ...

难道您在复苏细胞后就马上进行实验吗？
如果不是，刚刚复苏就有80％的存活率已经不错，经过几天的培养细胞会好起来的。

lagua123[使用道具]
三级
Rank: 3

UID 77374
精华 0
积分 437
帖子 533
信誉分 100
可用分 3511
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-16
状态离线

发表于 2012-9-9 12:59 资料个人空间短消息加为好友

小中大

本人刚复苏了2003年底冻存的一株细胞，24小时后观察大量细胞开始增殖，只有少量约5-10%细胞死亡，状态还是不错的。只要活细胞数量足够，再调理多几天细胞状态和数量就会恢复。

乌贼老弟[使用道具]
三级
Rank: 3

UID 74586
精华 0
积分 336
帖子 411
信誉分 100
可用分 2791
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-12
状态离线

发表于 2012-9-9 12:59 资料个人空间短消息加为好友

小中大

本人刚复苏了2003年底冻存的一株细胞，24小时后观察大量细胞开始增殖，只有少量约5-10%细胞死亡，状态还是不错的。只要活细胞数量足够，再调理多几天细胞状态和数量就会恢复。

————————————————————————————————

你复苏后细胞活力达到90％～95％，是蛮理想的，祝你顺利成功！
不知你复苏的是啥细胞？请问你是如何调理的？添加了生长因子吗？
需要调理多少天细胞活力才能接近冻存前水平？

乌贼老弟[使用道具]
三级
Rank: 3

UID 74586
精华 0
积分 336
帖子 411
信誉分 100
可用分 2791
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-12
状态离线

发表于 2012-9-9 13:00 资料个人空间短消息加为好友

小中大

难道您在复苏细胞后就马上进行实验吗？
如果不是，刚刚复苏就有80％的存活率已经不错，经过几天的培养细胞会好起来的。

————————————————————————————————————————————————————————————————

你好！本来我打算将复苏后的细胞继续传代培养扩增的，没想到在培养过程中细胞生长非常缓慢，几乎没有增殖能力！两周后细胞数不增反而逐渐减少了，三周后细胞都崩解、死亡了。
不知你们遇到了类似的情况否？

tangxin_80[使用道具]
四级
Rank: 4

UID 79896
精华 0
积分 549
帖子 757
信誉分 100
可用分 4621
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-17
状态离线

发表于 2012-9-9 13:02 资料个人空间短消息加为好友

小中大

QUOTE:

原帖由 乌贼老弟 于 2012-9-9 13:00 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
难道您在复苏细胞后就马上进行实验吗？
如果不是，刚刚复苏就有80％的存活率已经不错，经过几天的培养细胞会好起来的。

——————————————————————————————————————————————— ...

是什么细胞？用什么培养基进行培养？

但是我感觉还是细胞在冻存时候出了些问题。

okhaha[使用道具]
四级
Rank: 4

UID 77505
精华 0
积分 548
帖子 756
信誉分 100
可用分 4651
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-17
状态离线

发表于 2012-9-9 13:02 资料个人空间短消息加为好友

小中大

Theoretically, cells can be kept frozen in liquid nitrogen forever without loosing their ability to revive. What really affect the survival rate of cells after defreezing is the technique of freezing and defreezing. Most important is the freezing step, during which the temperature drop rate should be controlled not too fast, but not too slow.

12 1/2 1 2 ››