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从你的描述应该确定是污染了。避免污染的环节有很多,包括器械的严格无菌消毒,操作前无菌工作台消毒,进入工作台的物品包括手,用75%酒精擦洗,工作时操作接近酒精灯得火焰,都可以有效降低污染得发生。至于具体操作过程中得无菌,我是学外科的,不知楼主是否同意可以借鉴一下外科的无菌术原则,其实说白了就是要在操作的每一部清晰的判断什么是有菌或相对有菌,什么是无菌或相对无菌,原则就是不能让有菌物品接触无菌区域如细胞培养平,另外预防培养液的污染也很关键。我们那大部分人用二抗,我用的是三抗(P.C/S.M/G.M),至今还没有出现污染,如果有兴趣可以把我的三抗配方发给你。能把你认为污染的照片发给我看看吗?也很想看看,学习一下。