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标题:[求助]线粒体功能检测的方法

+小生怕怕+[使用道具]
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发表于 2012-9-9 14:45 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

[求助]线粒体功能检测的方法


我在把培养细胞线粒体提纯后,进行线粒体功能检测.现<解放军医学杂志>2002年第3期上有一篇文章提到用YSI5300型生物氧耗电极检测器及其Powerlab Chart软件检测并计算心肌线粒体氧化磷酸化功能:包括状态3氧耗率(S3),状态4氧耗率(S4),呼吸控制指数(RCI)和磷/氧比.我请教了该作者,他的实验是在香港大学里做的 ,我想知道内地是否有该台仪器及软件,就近广州者最佳,
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发表于 2012-9-9 14:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

你这里提到的线粒体功能检测主要是检测T3、T4、呼吸控制率、磷氧比等，这应该是检测线粒体功能的最基本的方法了，外文一般称作clark氧电极法，所需的器材就是clark氧电极。这个检测我们科从90年代初就一直在做，最初用的是北京304医院出的氧电极，现在用的是一台法国进口的氧电极，上海珊瑚公司代理。其实这个检测的原理挺简单的，不一定需要用软件来计算，只要有氧电极和一台描计仪就可以了，再根据描计出来的曲线计算T3、T4、RCR等。
在网上找了个氧电极测量结果的图，以供参考：


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发表于 2012-9-9 14:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
原来还可以这样测线粒体功能，又长见识了，谢谢两位。
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发表于 2012-9-9 14:48 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
请问你告诉我你的详细地址吗?有电话号码者最佳, 还有clark氧电极(法国进口)大概需要多少钱?谢谢!在线等待!
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发表于 2012-9-9 14:49 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我们现在用的这台氧电极是2万多，从上海珊瑚公司买的，我可以帮你去问一问他们公司的电话。
顺便提一下，做线粒体呼吸活性“必须”用新鲜标本做!!而且新鲜制备的线粒体放时间久了对呼吸活性的影响也会很大!
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发表于 2012-9-9 14:49 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
非常感谢,你们实验室在哪里,是在上海吗?如果在广州就好了,可以去你们实验室做实验吗?
呵呵,是的,我是用处于指数生长期的细胞在1个小时内低温提纯的线粒体,而且10分钟内必须检测其功能.在线等待你的消息!谢谢!
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发表于 2012-9-9 14:50 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我们在重庆，如果你要过来做实验当然欢迎，不过可能会给你带来一些不便，出门到底比不上在家好。其实氧电极也不贵，我建议你们最好买一台，因为也便于以后开展线粒体的实验，因为呼吸活性是线粒体的基本功能，是比较基本的检测指标。另外，氧电极需要配描记仪，我们的氧电极是接在八导生理记录仪上用的，用八导来作记录，当然你们也可以用其他的描记方式。
管仪器的老师现在不在，等我找到他再帮你问上海珊瑚公司的电话吧。
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 小中大
"八导生理记录仪"是什么?
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发表于 2012-9-9 14:50 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

如果你有兴趣的话，可以联系北京宝赛公司，可以提供给你关于线粒体检测的方法、提取线粒体的试剂盒以及相关的仪器信息，绝对有收获。
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 小中大
北京宝赛生物试剂公司提供的线粒体功能检测是检测凋亡细胞的一种方式,并不是我所需要的正常生长细胞的线粒体功能检测,不过还是谢谢你!
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