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标题:【求助】MTT实验结果判断

DONT[使用道具]
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【求助】MTT实验结果判断


上周做的MTT实验,结果很意外,对照组OD值0.2054,低浓度组OD值0.2084,中浓度组OD值0.3150,高浓度组OD值0.3792。按照MTT实验原理,活细胞越多OD值应该越高(产生的formazan约多),那对照组OD值应该最高才对。为什么我的结果刚好相反,是什么原因呢?请各位高人赐教,帮小弟分析一下,先谢了。
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DDD[使用道具]
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低浓度组\中浓度组\高浓度组是什麽药吗?
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yhz1973[使用道具]
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药物的颜色可能会对结果产生影响,比如阿霉素在浓度较高时显红色,从而导致高浓度组OD值反而较低浓度组高!
希望对你有用!
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我做的mtt也出现类似情况,我用的是肾上腺素损伤细胞,可是对照组的od值很低0.1左右,100微克的肾上腺素组的od值却很高,镜下观察这一组是细胞皱缩,有许多絮状物飘在细胞层上,不过孔板底确实长满了似乎是细胞的细小颗粒,起初以为是污染,但发现浓度高的用药组均出现这种情况,加入mtt没几分钟,就可以看到紫蓝色结晶。好象如果是污染的话mtt 染色应该是颜色偏浅的,但我的对照组一直是颜色偏浅,od值仅在0.1左右,请大家帮我分析以下,谢谢!
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更正,污染的话MTT结果的颜色是变深的,我做MTT时曾经有过个别孔细菌污染,结果污染孔颜色极重,能高出一个数量级。
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首先谢谢各位
我做的是用一种荧光物质(波长大概610nm)来干预Hela细胞生长,不知道是不是对结果有影响。另外孔内细胞未长满,小气泡,或者MTT的量是不是也会有影响,听听大家的高见吧
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小鱼鱼[使用道具]
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小气泡是有影响的,细胞没有长满也没有关系,加MTT后轻轻震摇均匀就可以了

MTT 就用过5MG/ML的,不知道,应该也有影响的,不过同一批细胞应该影响不大
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orangecake[使用道具]
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我也有同样的问题,给药组的od值高于空白对照,如果药物没有背景颜色的话,最大原因是什么呢/希望和大家交流
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daod[使用道具]
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我也有同样的问题,给药组的od值高于空白对照,如果药物没有背景颜色的话,最大原因是什么呢/希望和大家交流
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DONT[使用道具]
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我的目的是为了检测一种新的荧光物质对活细胞是否有毒性作用及是否抑制细胞生长(国外报道有毒性),选择MTT方法应该可以吧,希望能够得到大家的支持,一起交流一下。
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