【求助】请看我的细胞荧光染色照片

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标题:【求助】请看我的细胞荧光染色照片

ero11[使用道具]
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发表于 2012-9-10 17:14 资料个人空间短消息加为好友

小中大

请看一下我做的DAPI荧光染色，本人培养的是肿瘤细胞，经过照射后细胞出现凋亡小体，为黄色箭头所示！

附件

2012-9-10 17:14

77788587.snap.jpg (27.09 KB)

daod[使用道具]
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发表于 2012-9-10 17:14 资料个人空间短消息加为好友

小中大

"经过照射后细胞出现凋亡小体"

那么没有经过照射的细胞有没有也出现凋亡小体呢？如果有阳性对照和阴性对照的照片就更好了。

ero11[使用道具]
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发表于 2012-9-10 17:17 资料个人空间短消息加为好友

小中大

下次发帖请规范。

个人看法，请战友指正：
楼主所标记的不是凋亡小体，更不是凋亡细胞。所标记细胞光镜下形态可能是细胞呈肿大，胞核变大疏松。不符合凋亡细胞的形态学特征。个人怀疑分裂前的细胞，也或者是坏死前期细胞

红色标记为核固缩浓染的细胞，如果不是杂质应该是典型的调亡细胞。可在可见光下鉴别

黄色标记为正在分裂的细胞，胞核已分离但两个细胞尚未完全分开。

蓝色标记为含凋亡小体的细胞。在放大倍数下可见许多圆形或其他形状胞膜完整的浓染小体，可见光下应该是同在一个完整的胞膜内

未标记的还有不少含调亡小体细胞核，以及正常胞核

请各位继续分析！

附件

2012-9-10 17:17

41179651.snap.jpg (28.45 KB)

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发表于 2012-9-10 17:17 资料个人空间短消息加为好友

小中大

谢谢楼主指点！我把对照和高低剂量组的照片放上来，请楼主指点一下到底那些才是凋亡细胞
下面是200倍的对照组

附件

2012-9-10 17:17

33821773.snap.jpg (41.67 KB)

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发表于 2012-9-10 17:17 资料个人空间短消息加为好友

小中大

谢谢楼主指点！我把对照和高低剂量组的照片放上来，请楼主指点一下到底那些才是凋亡细胞
下面是200倍的低剂量组

附件

2012-9-10 17:17

17848430.snap.jpg (38.99 KB)

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发表于 2012-9-10 17:18 资料个人空间短消息加为好友

小中大

谢谢楼主指点！我把对照和高低剂量组的照片放上来，请楼主指点一下到底那些才是凋亡细胞
下面是200倍的高剂量组

附件

2012-9-10 17:18

76666732.snap.jpg (36.6 KB)

kewanqi2011[使用道具]
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发表于 2012-9-10 17:18 资料个人空间短消息加为好友

小中大

请教各位师兄师姐：
我想做细胞爬片的免疫荧光，要注意那些细节。是不是和免疫组化的抗体差不多，要什么样的荧光染料好？

gemei0115[使用道具]
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发表于 2012-9-10 17:19 资料个人空间短消息加为好友

小中大

你的细胞照片看上去细胞肿胀得很厉害，更像是坏死(necrosis)而不是凋亡（apoptosis). 你的照射剂量可能是太大了。建议你跑一个染色体DNA电泳确认一下是 necrotic cells 还是 apoptotic cells。

wood533[使用道具]
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发表于 2012-9-10 17:19 资料个人空间短消息加为好友

小中大

这两张图无法分别

avi317[使用道具]
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发表于 2012-9-10 17:19 资料个人空间短消息加为好友

小中大

那具体的凋亡小体是什么样子的？一定要细胞体积变小吗？我也做了相同照片的HE，那些胖一点的细胞在光镜下还是有完整胞膜的，坏死的会有吗？坏死细胞常常看到的是核的颗粒状碎片，没有胞膜的。当然我的照片里也有坏死的，一些看起来没有一个整体细胞的结构的那些。那书本上说的凋亡时细胞核会出现一些新月体的结构，我发现处理后这些结构确实多了，所以也只是挑这些视野来照，我不知自己的看法是否正确，请大侠们指点！！
to drake015：你不是说400倍的那张照片有些没标出来的也有不少的凋亡小体细胞，能具体给我指出来吗？谢谢了！

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