【求助】请看这是污染么?什么微生物?

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标题:【求助】请看这是污染么?什么微生物?

8princess8[使用道具]
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发表于 2012-9-10 17:28 资料个人空间短消息加为好友

小中大

培养海马神经元细胞,倒置显微镜里发现视野中很多小亮点,原来也有一点,但这次的多很多.有人说是细胞碎片,有人说是污染,怀疑霉菌.请大家帮忙看看.
先看200万倍视野的图片.

附件

2012-9-10 17:28

25070984.jpg (22.67 KB)

8princess8[使用道具]
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发表于 2012-9-10 17:28 资料个人空间短消息加为好友

小中大

100万倍视野里有发现如此一块.

附件

2012-9-10 17:28

76825723.jpg (32.51 KB)

8princess8[使用道具]
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发表于 2012-9-10 17:32 资料个人空间短消息加为好友

小中大

在200万倍视野里看到一块晕,然后调节微调,晕逐渐清晰,竟是小亮点的聚集.见下两图.高度怀疑霉菌.

附件

2012-9-10 17:32

16898302.jpg (18.69 KB)

8princess8[使用道具]
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发表于 2012-9-10 17:32 资料个人空间短消息加为好友

小中大

第二张

附件

2012-9-10 17:32

78454159.jpg (16.24 KB)

3648755[使用道具]
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发表于 2012-9-10 17:34 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我认为应该排除霉菌污染，因为霉菌污染大多为乱树枝状或棉花团壮，并且霉菌生长很快，蔓延很快，一旦被霉菌污染，几个小时后就会蔓延到整个培养瓶。另外也应该排除细菌污染，因为细菌的生长速度远远大于细胞的生长速度，培养基中的营养因子会被耗光，培养基变浑浊，变黄，细胞长势很快变差。象这种情况如果保证培养基没有问题的话，我想可能是细胞本身的问题，你可以在给细胞换液时用灭菌生理盐水或灭菌PBS将细胞冲洗几遍，但是如果不影响细胞生长的话我想大可不必太担忧。

8princess8[使用道具]
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发表于 2012-9-10 17:34 资料个人空间短消息加为好友

小中大

棉花团状?怎么我看第三张图就像棉花团啊.
我们是第一天用含胎牛血清的培养基,第二天换无血清培养基.会不会因为这个霉菌生长较慢呢?
像第三张图的光晕有很多个呢.
细胞生长确实是没有受影响.培养基也没有变色变浊.但我还是忍心把所有的细胞扔了.

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发表于 2012-9-10 17:35 资料个人空间短消息加为好友

小中大

有可能是支原体污染
建议作一个检测试验

kswl870[使用道具]
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发表于 2012-9-10 17:35 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我现在培养的海马神经元也有问题，在高倍镜下看，细胞表面有颗粒状东西。做膜片钳时，很难封接。但是神经元还是可以正常生长。应该不是细菌或者霉菌污染。有没有酵母污染或者支原体污染的图片？我们的显微镜没有办法照相，不然照一张上来看看。

kswl870[使用道具]
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发表于 2012-9-10 17:35 资料个人空间短消息加为好友

小中大

对了，我培养的海马神经元，长到7天左右，有些细胞扎堆生长，这是怎么回事？

8princess8[使用道具]
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发表于 2012-9-10 17:36 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我也有这样的情况发生.细胞[突起长得挺好,但是扎堆

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