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标题:【求助】冻存细胞用的DMSO需要过滤吗

okhaha[使用道具]
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发表于 2012-9-12 12:45 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】冻存细胞用的DMSO需要过滤吗


冻存细胞用的DMSO需要过滤吗?我把DMSO放在冰箱(2-4度)对它有损害吗?向园子里的师哥师姐 请教。
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greenbee[使用道具]
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发表于 2012-9-12 12:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

不需要过滤，，DMSO 必须是细胞培养级别的。新买的DMSO 本身处于无菌状态，第一次开瓶后应立即少量分装于无菌试管或瓶中，4℃保存。避免反复冻融造成DMSO 裂解产生有害物质。并可减少污染机会。如要过滤DMSO，必须选用耐DMSO 的尼龙滤膜。
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ritou1985[使用道具]
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发表于 2012-9-12 12:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
呵呵，楼主遇到我曾经遇到的问题。
冷冻保存使用的DMSO 等级， 必须为Tissue culture grade的DMSO ，其本身即为无菌状况， 第一次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中， 保存于4°C， 避免反复冷冻解冻造成DMSO 的裂解而分解出对细胞有害的物质， 并可减少污染的机会。
若需要过滤DMSO， 则须使用耐DMSO 的Nylon 材质滤膜。用于一般培养基过滤的滤膜是不能用的。
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ritou1985[使用道具]
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发表于 2012-9-12 12:47 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
一开始我也不知道，我试着用0.22微米的醋酸纤维滤膜过滤，呵呵，一看，滤膜全都融解了。
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hyuu[使用道具]
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发表于 2012-9-12 12:47 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

不用过滤,因为DMSO本身就是与乙醇一样的脱水剂,也是消毒的原理.无水酒精用过滤消毒吗?
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xueyouzhang[使用道具]
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发表于 2012-9-12 12:47 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我们实验室不过滤但是定期高压消毒。
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okhaha[使用道具]
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发表于 2012-9-12 12:48 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
DMSO还能高压消毒吗？就向高压消毒碳酸氢钠一样？　
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wood533[使用道具]
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发表于 2012-9-12 12:48 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我们实验室也是不过滤，但是在用时会进行高压消毒。
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Ao7[使用道具]
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发表于 2012-9-12 12:49 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我一直在用DMSO，不仅冻存用它，而且溶解药物也用它。可我从来没有消毒过它，也没有过滤过它，加至培养液里也没有什么事啊。另一个实验室用来冻存细胞放在室温几年都没事的，我想不要过于担心吧！
另外，我知道DMSO应该是贮存在室温的，用于细胞培养要到99.9%级的，它的凝固点是18度，放在冰箱会凝固的。不过我也见到一种在4度冰箱不凝固的DMSO，冻存细胞也没问题，但为什么，业务员也不知道！
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ROSE李[使用道具]
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发表于 2012-9-12 12:49 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我使用dmso主要是冻存细胞和加到药物中使用，总结一下dmso的使用：

１．冻存细胞和加到药物中使用可定购Ｓｉｇｍａ　等专用于细胞培养的dmso这样买来的dmso就是无菌的。

2.最好不要有dmso不会染菌的错误观念，即使dmso本身不会染菌，不注意操作，细菌、霉菌...一样会污染瓶口、塞子,对细胞培养一样是致命的。

3.DMSO是不能高压消毒的，DMSO在高温下挥发成蒸气，有潜在致癌性。

4．含有dmso的溶液，尤其是含有 dmso10%以上的，是不能用常规的硝酸纤维素膜除菌滤器过滤的，dmso会溶解硝酸纤维素膜，(这方面我可是有“血的教训”滴呜呜～）。过滤含有dmso的溶液需用聚砜膜滤器，PALL和Millipore 的目录上都有。

５．DMSO宜分装到无菌小瓶中－２０Ｃ保存，冻化似无影响？

６．冻存细胞时含DMSO的细胞冻存液要事先配制，因DMSO加入培养液的过程会产热。

欢迎交流HaHa～
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