细胞世界

你认为活过来的细胞是原来的细胞群一样的么？

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别灰心，还有可能活过来的。

多半差不多。
前段时间，因为我的液氮罐坏了。结果冻存的一株及其珍贵的杂交瘤细胞株在液氮完全挥发后2－3天我才发现。没办法了，只有把细胞离心下来接种到细胞瓶里，显微镜下看了1个小时都没有找到一个肯定是活的细胞（在约1千万细胞中）。但17、18天后，两个细胞克隆长了起来，发现还是分泌原来的抗体（最后又做了一次克隆化）。
jjyy战友，如果你能断然否定活过来的细胞跟原来不一样，那么杂交瘤技术以及筛选转染稳定株时挑取单克隆的实验你又怎样理解呢？还有，人的新陈代谢每天都在进行，因此人的指纹事实也是不断变化的（但矛盾的是我们常常认为它是不变的）；即使楼主没发生这样的事，细胞只要在培养当中，它还是不断在变的（例如每次最普通的换液都会导致细胞的形态和代谢发生变化），只是，如果没有很特殊的因素（比如抗生素筛选、病毒转染等），我认为还是没有多少变化（尽管他们的Expression profiling变化得比人得指纹更加大）
一家之见，信不信由你。

另注：我也购买过ATCC的细胞，用他们指定的培养基没有养活；而同时接种的该细胞用我自己常用的配方却养活了，也总算没有全军覆没。

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你认为活过来的细胞是原来的细胞群一样的么？

你去看看那个MCF-12A这个细胞株怎么来的，它是如何从ATCC培养起来的？就知道这个细胞肯定不是原来的细胞株了，当然你一定要认为，它就是原来的一样，我也没办法，我不可能给你做cytogenetic characterization or DNA fingerprinting

我不知道我究竟得到了这里多少帮助，要个vector不给，想下载的东东，说好是5分区有，可是却放到了20分区，求人也不给，（不要告诉我，努力赚分），我赚到了20分有什么用，那东东要是又被人放入50分区呢

我只是告诉楼主，那个活下来的细胞不能用了。

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同意楼上战友的观点！！！
细胞株应该是增殖等能力都很强的细胞，只要看到有细胞就不应该放弃！！！
另外也不一定是培养基的问题，注意是否冻存和复苏过程出现什么问题没有，冻存复苏的要点大家理论都很清楚，但要注意实践操作：冻存要慢冻，复苏则要求快融：我们是事先将37度水浴锅打开，然后快速将冻存细胞从液氮取出后投入37度水浴，只要全部溶解就立即取出放培养瓶加培养液（也有低速离心去除DMSO影响），4－6小时后细胞贴壁后换液，（如贴壁不好，可延长点时间）。

还有一点就是要记得注意液氮罐里是否还有液氮，要注意补充液氮，否则其他的都将前功尽弃！！！

坚持养几天，看看有没有效果？祝你好运！

（另外，相信大部分dxyer到丁香园来都是来寻找求助的，如果能帮忙最好；就算帮不上什么忙，最起码也要给予信心和鼓励，不是嘛？希望不要说话太刻薄哦^_^...换位思考一下啊）