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我有原代大鼠胸主动脉平滑肌细胞的α-actin免疫细胞化学图片,不知道能帮的上忙不?
另外免疫组化步骤很简单,试剂盒都有详细步骤说明,再就是一般的试剂公司产品目录后面都会有类似的步骤附录,看看就行,这里顺道给你附上一份:将细胞传代接种至盖玻片上,待生长呈单层后,作α-actin免疫细胞化学染色。步骤如下:
(1)4%多聚甲醛固定20min
(2)蒸馏水洗3min×3次
(3)0.6%H2O230min,以灭活内源性过氧化物酶
(4)0.01M PBS洗2min×3次
(5)滴加正常山羊血清,室温20min,不洗
滴加小鼠抗SM α-actin多克隆抗体(1:100稀释),4 0C, 湿盒过夜
(7)0.01M PBS洗2min×3次
滴加生物素化山羊抗小鼠IgG,室温20min
(9)0.01M PBS洗2min×3次
(10)滴加SABC,室温20min
(11)0.01M PBS洗5min×4次
(12)DAB显色10-15min, 水洗
(13)脱水,透明,中性树胶封片,显微镜观察
结果判定:α-actin阳性细胞胞浆呈细颗粒状棕黄色沉淀,均匀分布