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标题:【求助】胶原酶配制的细节

october7[使用道具]
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发表于 2012-9-15 14:16 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】胶原酶配制的细节


想请问各位：胶原酶五配制的时候直接用HBSS溶就好了吗？还是要在36.5或37度下溶2-3小时，那样活性会不会丧失？还是在常温下搅拌后四度过夜？然后再0.22的膜过滤并分装对吗？这些是不是在产品说明书上都有，去网站查吗？
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hyuu[使用道具]
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发表于 2012-9-15 14:17 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
以下方法来自《细胞培养》 司徒镇强编，希望对你有帮助。
1.用Hanks配制
2.36.5摄氏度搅拌溶解2h,4摄氏度过夜
3.滤过消毒
4.分装成等份使用（1-2周内）
5.长时间贮存宜在-20摄氏度
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发表于 2012-9-15 14:17 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我也有查司徒的书啊，没有胶原酶的配制方法啊
酶可以在３６.５度的条件下那么多之间吗？不会影响它活性？
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kswl870[使用道具]
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发表于 2012-9-15 14:17 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
那个配制方法在书后的附录里，你再看看。
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yueban-1147[使用道具]
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发表于 2012-9-15 14:18 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我今天刚配制了胶原酶Ⅴ，本想按书上说的做，可发现它很好溶，就直接过滤了，现4度保存，不知这样配可否？急！
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zhenxin[使用道具]
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发表于 2012-9-15 14:20 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我们做乳鼠胰岛细胞分离用的胶原酶都是现用现配，配好后直接过滤就可以用了，而且也很好溶啊，4度保存不会失效吗？
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发表于 2012-9-15 14:20 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我是1型 胶原酶，我也发现很好容
溶解，室温就可以阿 ，

——————————————————

4度保存不会失效吗？

——————————

我们这里是-20度
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www.1[使用道具]
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发表于 2012-9-15 14:21 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我是1型 胶原酶，我也发现很好容
溶解，室温就可以阿 ，
小玲 wrote:
，4度保存不会失效吗？

我们这里是-20度
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fsdd817[使用道具]
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发表于 2012-9-15 14:21 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

胶原酶可配在含血清的培養液,
因為血清裡沒有抑制胶原酶的物質.
只有trypsin才不能.
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any333[使用道具]
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发表于 2012-9-15 14:21 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

胶原酶和胰酶都是－20度保存，如果4度存放，请在一周内用完！！！

血清不会使胶原酶灭活！胶原酶消化，可多加液体冲洗多次，以稀释胶原酶浓度。

我用的2型胶原酶，D-HANKS配的，好溶，溶完直接0.22um过滤除菌，－20度保存，用前可放37度溶解，但时间不能过久，防止酶活性受影响！
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