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标题:【讨论帖】摇瓶培养细胞专题

cocacola[使用道具]
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发表于 2012-9-15 17:46 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【讨论帖】摇瓶培养细胞专题


请做过或者正在做摇瓶培养细胞的大虾们来谈谈经验啊？
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fei1226com[使用道具]
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发表于 2012-9-15 17:47 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
楼主也可以先谈点成功的检验或失败的教训啊。
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jujuba[使用道具]
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发表于 2012-9-15 17:47 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我是刚开始做这方面的实验，很需要诸位老师们的宝贵经验啊！
例如：摇瓶培养是否确实能否节约培养基的成本
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pencil菲[使用道具]
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发表于 2012-9-15 17:48 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

要节约培养基的成本最好是用生物反应器灌流培养.
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baidukk[使用道具]
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发表于 2012-9-15 17:48 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

用生物反應器來節省培養液的能力有限,
因為培養液的養份有限, 細胞對代謝物的耐受度差...
所以還是得常換培養液...
聽過工業上的極限是1 ml可養到10的7次方個細胞...
像這麼高的培養密度一定要不斷灌流才行...

用生物反應器的好處主要是
1.節省培養空間(看看培養皿那麼大的體積才養一點點細胞)
2.節省人力操作(幾個人就可以操作一個幾百公升到幾噸的反應器)
3.控制培養調件(生物反應器可以完全控制溶氧, pH, 培養液成份...還有很多)
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cocacola[使用道具]
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发表于 2012-9-15 17:49 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
摇瓶培养成纤维细胞很难贴壁啊，转速比较难控制，除此之外又能如何改进呢？
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发表于 2012-9-15 17:49 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
搖瓶本來就是不要讓細胞貼壁的啊!
甚至要防止細胞貼壁,
我們得預先在玻璃瓶內部披覆一層矽 (可買Sigmacote, Sigma),
讓玻璃表面變成疏水性(玻璃本身是親水性的),
這樣玻璃就不會黏細胞了.

有些細胞可以懸浮培養的當然就用搖瓶,
有些一定要貼壁的細胞,
用搖瓶時要加入"微載體 (microcarrier)"讓細胞長在上面,
然後細胞便與微載體一起懸浮來培養.

搖瓶是最基礎的懸浮培養法,
如果你希望要能做進一步的控制,
就要用spinner flask,
更好的便是bioreactor.
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cocacola[使用道具]
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发表于 2012-9-15 17:50 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我的细胞是要贴壁生长的，不贴壁，就会在培养基中聚集成很大一团团，不能进行下面的实验工作。必须贴壁，才能进行下一步实验。

另外，spinner flask不是指摇瓶吗？前者可更精密地调控转速？谢谢先
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redbutterfly[使用道具]
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发表于 2012-9-15 17:56 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我說的搖瓶是指細胞放在三角錐瓶裡去振盪培養...
細菌培養很常用, 細胞培養比較少人用的,
通常就直接用spinner flask.
這個的轉速不是可以控制的嗎?
要多少轉速都可以設定啊!
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cocacola[使用道具]
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发表于 2012-9-15 17:56 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

你说的是细菌培养专用的振荡培养摇床吧

动物细胞哪里经得起这么折腾喔？！
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