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标题:【求助】可以口对口倒液体吗？（无菌操作时）

fei1226com[使用道具]
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发表于 2012-9-15 18:20 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】可以口对口倒液体吗？（无菌操作时）


我想将1000mlRPMI1640（已消毒）在超净台分装到10个100ml瓶，该怎么装呢？？用滴管一点点吸似乎太麻烦，想直接用口对口倒的，不知道好不好，觉得好象这种方法快也防止污染更好。求教各位高手意见
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xue258[使用道具]
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发表于 2012-9-15 18:20 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我们都是直接倒的，但倒时两个瓶口不要接触，多练练，开始可能不习惯
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moonlight45[使用道具]
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发表于 2012-9-15 18:20 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

当然不能口对口倒啦，这不是规范操作，还容易导致污染，虽然在超净台里，仍然可以污染的，不然里面放酒精灯干吗呢？
培养液的配制好后都是滤过除菌的，在滤器的出口处接一根管子（能消毒的），将你的10个100毫升瓶放在下面接，当一个瓶好了时，用个夹子夹住出口换另外一个，依次类推。过滤时氮气压力不要太大（如果是正压滤过），这样容易操作点。这都是在超净台里操作，细心点就可以了！
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发表于 2012-9-15 18:21 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我想将1000mlRPMI1640（已消毒）在超净台分装到10个100ml瓶，该怎么装呢？？用滴管一点点吸似乎太麻烦，想直接用口对口倒的，不知道好不好，觉得好象这种方法快也防止污染更好。求教各位高手意见

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最好别这样做，用吸管吸取也不是太麻烦。直接用口对口倒的话难免会有污染的可能，你不能保证瓶子的任何部分都是无菌的。做细胞就不要怕麻烦。安全是第一位的。另外你在过滤除菌的时候直接用小瓶接着不就行了？
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发表于 2012-9-15 18:23 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

呜－－偶都是倒的呀
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owanaka[使用道具]
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发表于 2012-9-15 18:23 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

可以口对口倒的。但是倒之前，要用酒精棉球将两个瓶口都擦一遍，然后在酒精灯上把瓶口烧一下，倒时动作要干净利索，这样操作不会污染！！用吸管吸反面增加污染的机会，因为要吸很多遍，来来回回的更容易污染。我老板以前在法国国家重点实验室也是这样做的。
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lagua123[使用道具]
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发表于 2012-9-15 18:23 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

可是我是买的已配好已消毒的培养基，所以，不能一个一个瓶子的接。我们的吸头也不是很强，一次就只能吸2-3ml，所以我没有别的办法咯。
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发表于 2012-9-15 18:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

1.细胞培养时，最怕的莫过于污染，所以我们的每一个环节必须要按严格的无菌操作进行，新手更应注意这一点，要有耐心，不得偷懒，才能确保体外实验顺利进行。
2.既然是搞科研，就应该用科学的思维和方法面对实验。要知道瓶口可是“危险区”，你能保证无菌？想直接用口对口倒是不行的，属不规范操作，极容易导致污染，尽管在超净台里。
3.或许细胞培养老手可以这么做，也不会出现什么问题，因为他们的技术已经相当娴熟，有能力避免一些可能出现的问题。但他们的操作是不规范的，可是，对他们来说这种方法又是可行的，对这种情况应区别对待。
4.用吸管将1000mlRPMI1640（已消毒）在超净台分装到10个100ml瓶里，是很麻烦。我建议你下次配RPMI1640液时，提前准备好10个100ml瓶子，在过滤消毒时将100ml瓶子直接接到滤器的出口，盛满后再换瓶子即可，很方便的。
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dongdongqiang[使用道具]
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发表于 2012-9-15 18:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

真是庸人自扰！把瓶口用火烧后，口对口倒，可以互相接触，没问题的，从来没污染过。
为什么会污染呢？
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yueban-1147[使用道具]
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发表于 2012-9-15 18:24 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我个人认为只要能保证不污染，就是可行的，没有必要一定要遵循某些所谓的“原则”。
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