制备液相色谱

比如要制备纯化一个10克的化合物，首先要做分析型的，再放大。请大家说一说放大时如何选择柱径、填料量和流速，还有就是放大时是不是也该在制备柱上做相应的小试，而如果小试分开了那超载进样时又需要注意什么呢？请各位经验丰富的大侠多多赐教！最好详尽地把步骤和注意事项罗列一下，谢谢！

不知道放大时候用的柱子是不是自己填的 以前我用过自己填的制备柱 柱效肯定没有买来的那种高 所在先要在制备柱上跑一下 条件也要在制备柱上摸索
在接各组分的时候最好将流动相 掐头去尾 有时候检测器上显示分开了但是一浓缩以后还是会有杂质

放大时也该在制备柱上做相应的小试

实验前查一下所做样品的理化性质，特别是是否有人做过类似的制备纯化方法。最好有点借鉴，至少分析方法必须找到。
1分析实验
通过分析实验的得到手中粗品的信息。
做分析小试实验时，最好选择与制备柱同样的填料，一般高压制备柱的填料都在10U，这时通过优化方法，充分分离。选择自己想得到的目标化合物，然后在分析设备上继续做过载实验，通过这些实验可以得到该化合物在填料中的载量。过载实验是不能在制备上做的，因为代价过高，分析做完后，到制备上优化条件。
2根据载量，还有你想几次作出10g样品，确定填料的多少，然后确定柱子的大小，接着确定泵的流速和检测池的大小。
3一般公司分析仪器方法到制备都有现成的公式，然后在制备上再优化条件。最终定下纯化方法前，你还得考虑两方面：纯度和收率。因为制备液相是追求的是产量和效率，切割时，少切点肯定纯度高，但收率明显降低。

物质的纯化一般用蒸馏,重结晶等方法.一般分小试,中试,及工业化生产.

制备HPLC首先要进行分析HPLC，再进行放大。在分析柱柱做超载实验，按照截面积比放大至制备柱。

尽量选择同一填料色谱柱，否则填料不同，例如虽然都是C18，不同厂家的生产工艺及介质（硅胶，杂化等）不同会导致分离差异。

放大时选择柱径、填料量和流速，当然柱径大上样量也大，但是色谱柱也贵。根据分析柱的流速折算。4.6×150，1ml/min 如果对应制备19×150，流速＝(19/4.6)*(19/4.6)=17 ml/min

当然这时理论值，你在做制备时根据分离情况可以调整一下梯度或流速。如有不明可继续探讨。另外高压制备价格贵，如果样品能通过沉淀，结晶或FLASH粗分一下，效果会很好。

10g的量，不少啦！

化合物极性如何？ 若偏小的话，采用ACN-H2O，preparative HPLC，那花费得考虑下了。。。

原理性方面，楼上已经总结得足够详细了，这里补充下可能会遇到的实际问题：

1、样品的溶解度——待纯化的化合物在H2O、MeOH、 ACN中的溶解性如何？（样品的溶解度是制约preparative HPLC的一个重要因素，若样品难溶，一般不用制备HPLC来纯化）

2、样品的化学结构——待纯化的化合物大体什么结构？含什么样的官能团，酸性、碱性 or 两性，这涉及到流动相添加剂，以及如何回收样品除去溶剂。一般preparative HPLC添加挥发性改性剂，这点，楼主肯定清楚。

3、样品的热稳定性——这涉及到后处理了，分离后，旋蒸除水过程中是否会变坏？（对于含-CN氰基的化合物，活泼酯等尤其得留心注意），若不太稳定，可以在室温旋蒸掉乙腈后，萃取或者沉淀出目标化合物。

非常感谢大家给出这么多建议和意见，可惜最佳答案只能设一个，那就给aa_tang这个赠言最多的家伙吧，他的苦劳最大嘛！不过其余各位的建议和指导也都很好，让我明白很多，再次感谢大家！

现在分析型的柱子摸出条件：流动相配比、洗脱时间梯度等条件，换成制备注，也需要魔条件，看看你要的峰是不是完全分开了，没有干扰了。