细胞世界 » 讨论区 » 经验共享 » 【求助】骨髓基质细胞

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 19  1/2 12››
 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴
打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:【求助】骨髓基质细胞

IAM007[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 75217
精华 0
积分 464
帖子 608
信誉分 100
可用分 3861
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-20
状态 离线
1

发表于 2012-9-29 10:36 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】骨髓基质细胞

请教各位大侠,骨髓基质干细胞好不好养?将它诱导为骨细胞有什么技巧？这里先谢谢了！
顶部
woshituzhu[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 75774
精华 1
积分 384
帖子 443
信誉分 102
可用分 3001
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-10-27
状态 离线
2

发表于 2012-9-29 10:36 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
不知道老总兄想养什么骨髓基质干细胞？人的？还是小鼠？
请参阅下列战友们的讨论：
cuturl('http://www.jiansuo.net/cgi-bin/ut/board_show.cgi?id=2&age=0&pg=1')
顶部
leifengta[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 77488
精华 0
积分 514
帖子 748
信誉分 100
可用分 4517
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-17
状态 离线
3

发表于 2012-9-29 10:37 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
骨髓基质干细胞比较好养，小牛血清都可以搞定，当然胎牛长得更好

骨髓基质干细胞诱导成骨是很成熟的技术，因为骨髓基质细胞中含有决定性成骨前体细胞，不需要诱导就可以成骨。骨髓基质细胞中还含有非决定性成骨前体细胞，在一定诱导条件下诱导成骨。常用诱导液的成分是：10mmol/L beta甘油磷酸钠、50ug/L 维生素c、10-7mmol/L 地塞米松
顶部
zhezhe[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 72891
精华 1
积分 610
帖子 856
信誉分 102
可用分 5088
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-9-15
状态 离线
4

发表于 2012-9-29 10:37 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我也在养鼠骨髓基质细胞，用10mmol/L beta甘油磷酸钠、50ug/L 维生素c、10-7mmol/L 地塞米松 诱导成骨细胞，但对照组和诱导组ALP都是阳性。看来让骨髓基质细胞保持不分化状态还有点难！！请指教！！
顶部
leifengta[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 77488
精华 0
积分 514
帖子 748
信誉分 100
可用分 4517
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-17
状态 离线
5

发表于 2012-9-29 10:38 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
ALP阳性是某些干细胞的特性，骨髓基质细胞（骨髓间充貭干细胞）是ALP阳性的，而且骨髓基质细胞有确定性成骨细胞，可以不经过诱导长期培养即可成骨，经过成骨诱导后ALP阳性增强。
顶部
IAM007[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 75217
精华 0
积分 464
帖子 608
信誉分 100
可用分 3861
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-20
状态 离线
6

发表于 2012-9-29 10:38 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
多谢点化！我在培养过程中也发现长期培养骨髓基质细胞，部分细胞形态变成成骨细胞样。但要避免骨髓基质细胞分化成成骨细胞而分化成其他组织细胞需要注意什么呢？
顶部
leifengta[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 77488
精华 0
积分 514
帖子 748
信誉分 100
可用分 4517
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-17
状态 离线
7

发表于 2012-9-29 10:39 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
1 可以尝试使用低密度培养的方法，低密度培养可以较好的保持细胞的增值能力和活性
2 可以用一些有丝分裂原如bFGF等
顶部
IAM007[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 75217
精华 0
积分 464
帖子 608
信誉分 100
可用分 3861
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-20
状态 离线
8

发表于 2012-9-29 10:41 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
你所说的低密度培养是指什么？原代培养中就有分化细胞，而且细胞总是呈集落生长，局部密度大，但周围可能没有骨髓基质细胞。请赐教！！
你是否也在养骨髓基质细胞？我们可以多交流！
顶部
leifengta[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 77488
精华 0
积分 514
帖子 748
信誉分 100
可用分 4517
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-17
状态 离线
9

发表于 2012-9-29 10:43 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
Bruder等采用较低密度（5000/ cm2）传代培养人BMSC时，发现两周左右细胞集落融合，细胞数扩增3-5倍。有研究发现，极低密度（0.5~12/cm2）传代更有利于细胞增殖。在0.5/cm2至12/cm2范围内，尽管每100个细胞所形成的克隆数相同，但克隆的大小却截然不同 。对比发现，1.5或3.0/cm2传代培养所形成的克隆大，10天左右细胞扩增2000倍，对数生长期12小时即扩增一倍；而6或12/cm2传代培养所形成的克隆小，其中12/cm2传代10天仅扩增60倍左右，对数生长期倍增时间为24个小时。另外，实验中还发现，按1.5/ cm2密度传代培养可持续传代50代，而按5000/ cm2密度传代培养仅传代15代。
顶部
月牙牙[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 73230
精华 0
积分 238
帖子 215
信誉分 100
可用分 1841
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-9-20
状态 离线
10

发表于 2012-9-29 10:44 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
成骨诱导及细胞化学染色
取3月龄、12月龄大鼠生长良好的第3代骨髓基质细胞以相同密度接种于4孔板,均分为对照组及诱导组，对照组培养条件同前，诱导组条件为：a-MEM培养液+10%胎牛血清+100U/ml青霉素+100U/ml链霉素+地塞米松10-7mol/L +b-甘油磷酸钠10-2mol/L +抗坏血酸50µg/ml，37℃，5%CO2孵箱静置培养。对照组及诱导组均每3天后换液一次。7天后行碱性磷酸酶细胞化学染色；12天后行von Kossa 染色。
OCN测试前48小时，诱导液中添加VitD3（10-7M）。
顶部
 19  1/2 12››