小中大【求助】细胞一夜之间全死了
有人向我求救:
说他养了数种细胞,这些细胞要求用不同的培养基。前一天细胞的状态还不错,结果第‘二天一大早就发现,细胞全死了,只有一些贴壁生长的细胞还有极少的细胞还贴壁,估计也不行了。现象是悬浮的细胞出现很多的胞浆颗粒并且细胞都是分散的(正常的情况应该是细胞饱满,透亮,细胞扎堆),悬浮细胞则绝大部分都漂起来了。
这样的事情已经发生过好几次了。经常是一、两周出现一次。
为此,他专门招孵箱公司的人来把CO2和温度都校正了,孵箱的水也没有问题。CO2应该没有问题,同别的实验组用的CO2出自同样的厂家,他们的细胞没有问题。
他向我求救后,我把他的培养基要来,自己养细胞5天没有问题(在别的实验室,重新复苏的细胞),结果细胞长好了之后,那到他那里,好了2天(细胞生长旺盛),第3天突然全不行了。
我觉的自己培养细胞的经验应该不错了,可对这个问题真是没辙了!
孵箱检测了,师傅说没有问题,还会有其它的问题吗?
CO2别的组也在用,应该没有问题。
培养基,我试了,再说他同时在使用多种培养基,同时出问题的几率很小。他只加谷氨酰胺,pH也试过。
细胞污染也解释不了,全部细胞,用不同的培养基,一起污染?而且镜下看不出污染,支原体?也不能同时呀!
看看各位高手有什么经验,这应该属于疑难杂症了!帮我分析一下,这样的情况发生的毫无规律。
先谢谢了,也许您的分析会让我茅塞顿开。