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标题:【求助】 有谁知道培养基中加肝素的浓度?

tianmei001[使用道具]
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【求助】 有谁知道培养基中加肝素的浓度?

我在养血管内皮细胞,但贴壁效果不佳,想加点肝素,但不知道浓度,请高手指点
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qqq111[使用道具]
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在养血管内皮细胞的时候,我也曾经加过肝素,浓度是50IU/ml加入到培养液里,但好像效果对促进细胞生长不是很明显,肝素在内皮细胞培养中的作用是抑制其他杂细胞的生长,尤其是平滑肌细胞的生长,使内皮细胞成为生长优势群。如果要增加细胞的帖壁率倒可以尝试用纤维连接蛋白处理培养瓶,浓度是5ng/ml,效果不错的。兄弟你养的是什么动物的血管细胞,希望多多交流培养经验
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wsll[使用道具]
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我也是养内皮细胞的,楼上兄弟养的是什么内皮细胞,人脐静脉?还是牛主动脉?多多交流
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bling[使用道具]
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我养过HUVEC,主要经验分离时要用交好的胰酶或胶原酶,不加因子如bFGF,ECGS,培养不过3-4代。我的配方M199+20%FBS+GLU+P/S+Vit C 50ug/ml+肝素50U/ml。
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bling[使用道具]
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必须用新的塑料培养瓶,可包被明胶0.2%。
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S6044[使用道具]
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请教:我也想养HUVEC,想买细胞株,但国外的太贵,不知国内哪里可买到,跟自己直接从脐带中分离的有何不一样
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zzzz[使用道具]
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我也需要人血管内皮细胞,不知那位仁兄可以提供,相关资料也行,我这儿有ECV-304,如有人要用可以和我联系。
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zzzz[使用道具]
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GLU是指谷氨酸还是葡萄糖?P/S各指什么?它们的浓度是多少?用什么配制?
谢谢指教!
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rxcc33[使用道具]
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QUOTE:
原帖由 zzzz 于 2012-10-1 21:34 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
GLU是指谷氨酸还是葡萄糖?P/S各指什么?它们的浓度是多少?用什么配制?
谢谢指教!  

Glu,可能指谷氨酰胺,glutamine,一般终浓度约1mM, 用超纯水配制100倍浓缩液,临用时加入。
p/S应该指双抗吧,penicillin and streptomycin, 将粉剂溶于生理盐水中,配制成100倍浓缩液。
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yysr238[使用道具]
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10
 
我在养微血管的EC,用的是组织块方法,
但是文献上说要用培养瓶,我这里没有只好用培养皿。
不知道是否有影响。
另外我的内皮细胞要82H才出来,比文献报道晚了20个小时,不知道是为何?
有上海地区养微血管内皮细胞的吗?联系联系。
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