小中大【求助】有哪位在养脐动脉平滑肌细胞？
刚开始学习养细胞，而且教研室没有人养过，全靠自己摸索。试验仪器，设备一点一滴买起花了三个月，刷瓶子一个月，配液体一个月，前后培养了三次，均以失败而告终。郁闷阿！
我用的是据说最简单易行，成功率高的组织块培养法，完全按照文献所说程序进行，DMEM培养基，20％小牛血清，双抗，为了弥补培养液中谷氨酰胺分解，还另外加了100倍浓度的谷氨酰胺溶液。
培养结果是：组织块贴服可以，仅有小部分飘起来；没有细菌污染；培养液一段时间后也偏酸性，说明co2可以进入；但已经12天了，始终没有文献所说，有平滑肌细胞从边缘爬出。
自己分析原因：
1 剪切小块似乎远远大于1mm3（这确实是个技术性的活，因为我的手臂已经剪麻了，也成肉酱了，但好像还是比较大）
2 瓶底铺的不够均匀，我是用玻璃分针将组织块均匀分布，老是粘在一起。
3 用的co2培养箱没有水槽，不知道有没有影响？
还请高手帮我分析一下，我没有注意到的地方，万分感谢！
另外，准备下次实验机械剪切和胶原酶消化联合使用，请高手指点需要注意的地方，谢谢！
