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标题:【求助】HepG2的培养

lixi559[使用道具]
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【求助】HepG2的培养


各位师兄师姐:
我在养HepG2,从武汉大学购买的细胞株(购买时细胞状态就不太好),开始时使用DMEM(PH7.2),细胞生长较快,但细胞形态不好,大多成圆形,且细胞成团生长。后改用1640,PH7.2时几乎无细胞生长,PH6.8时细胞生长也非常缓慢,细胞形态也不好,我买的是GIBCO的培养基和小牛血清。请问各位我该怎么养这种细胞,现急需各位指导,还有武汉哪家实验室可以买到状态较好的HepG2,谢谢
另外,我是用0。02%EDTA消化15分钟后拍打,不是吹打,以前养别的细胞都是拍打,长的也满好
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铜雀[使用道具]
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各位师兄师姐:
我在养HepG2,从武汉大学购买的细胞株(购买时细胞状态就不太好),开始时使用DMEM(PH7.2......

——————————————————————————————————————————————————

武汉CTCC有,不多说了;

美国ATCC有:
cuturl('http://www.atcc.org/SearchCatalogs/longview.cfm?view=ce'),4385673,HB-8065&text=HepG2&max=20
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大白菜[使用道具]
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我用MEM培养,效果不错,HepG2细胞是成团样生长,或集落样,建议用胰酶+EDTA消化。其本身生长不是很快,每周传2-3代。建议参考ATCC的说明。
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idea2011[使用道具]
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这么好养的细胞也能死实在是没法了。
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131415[使用道具]
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可能有支原体污染, 我的经验是偏碱时长得更好。重新来吧!
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whitesheep[使用道具]
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我使用DEME培养的,消化使用0.25%的胰酶,通过镜检待细胞间隙增大,细胞呈圆形时即可停止,再用PBS吹打即可!细胞的生长状态是非常好的!
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redbutterfly[使用道具]
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我想请教,HepG细胞有无白蛋白的表达,还有肝细胞的其它功能吗?
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tieshazhang[使用道具]
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8
 

武汉这种细胞株太多了,协和医院外科有,同济医院马丁实验室也有,同济医大免疫室也有,很好搞的呀,我用了点小牛与胎牛血清加在一起,狂长,放了四天就长満了一升培养瓶
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sunnyB[使用道具]
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0.25%胰酶和0.02EDTA按1:1做消化液。消化前37度温浴,觉得消化时间太长。两种培养基培养的特征如你所述。
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okhaha[使用道具]
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我们用的是MEM+1%非必须氨基酸,消化用2x的胰酶+EDTA,注意消化千万不能过头.(消化过头细胞成团后,下次就很难分开了)
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