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标题:【求助】谁谈谈"黑胶虫"?多谢!

周伯通pp[使用道具]
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发表于 2012-10-7 12:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】谁谈谈"黑胶虫"?多谢!


最近,我怀疑我们实验室污染了不明微生物.
症状是:培养液有"脏东西"----小黑点,无运动,有的成集落样生长.培养液不变酸.
再看看这个,
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=66&id=84268&sty=3')<IMG%20SRC='images/smiles/smile_sad.gif'%20ALT='悲伤'%20WIDTH=15,HEIGHT=15><IMG%20SRC='images/smiles/smile_sad.gif'%20ALT='悲伤'%20WIDTH=15,HEIGHT=15><IMG%20SRC='images/smiles/smile_blackeye.gif'%20ALT='丢人现眼'%20WIDTH=15,HEIGHT=15><IMG%20SRC='images/smiles/smile_angry.gif'%20ALT='发怒'%20WIDTH=15,HEIGHT=15>
感觉挺恐怖的!
所以很想了解一下有关"黑胶虫"的知识,比如被其污染的表现,如何判断,防治等等...
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chuntian1983[使用道具]
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发表于 2012-10-7 12:58 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
你可以先看看其他帖子，比如下面这个，看看你的细胞现在是否处于这种情况。
cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=66&id=182958&sty=3')。
我上次发了一个回帖，没有发上，不知道什么原因。现在我的细胞已经没有任何问题了。因为细胞本身有G418抗性，所以在此基础上处理了一段时间（约10天左右),污染没有明显加重，但是也没有改善。有一次，改用含5倍浓度双抗的D－hanks，直接培养细胞30min，然后冲洗。冲洗后细胞所剩无几，但黑色的黏附物也几乎不见。然后继续加G418培养。目前没有问题。同时，在这段培养过程中复苏的293细胞，培养两天后却看到了黑色的运动很快的生物体，不知道是什么。考虑到复苏293细胞的培养瓶是原先的培养瓶，虽然经过了正规处理，还是下定决心扔去所有的用于293培养的培养瓶及培养液。
自己曾经养过几年细胞，从来没有见过这样的污染，甚至能在培养液看到运动的生物体，简直不可思议。到目前为止尚不清楚前后两次污染是否为同一种污染，且究竟为何种污染？希望大家能够讨论。
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jujuba[使用道具]
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发表于 2012-10-7 12:58 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我的细胞中也有这种黑色的虫子，且细胞越多，他也越多，且我感觉其喜酸，因为每次我粗心忘换液时，这种虫子就变多了。真是头痛。他们有人说是血清中带的，不知对吗？
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milkdog[使用道具]
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发表于 2012-10-7 12:59 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我以前培养细胞的时候也发生过类似的情况，在倍数稍高的显微镜下可以看到小黑的物体不停的扭动，我的同学戏称他们在“跳disco”。如果经常换液的话，细胞密度还较高，可能暂时对其会有一定的抑制作用。但是他们很顽固，凡是你希望细胞活着所采取的方法，基本上都杀不死他们，他们总有办法逃过你的各种处理措施。
如果不希望造成大规模的污染，最后将你曾经接触过“黑胶虫”的物品彻底消毒或处理掉，包括培养箱最好彻底消毒一下，以保证以后实验的顺利。
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TNT[使用道具]
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发表于 2012-10-7 12:59 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

请问一下，黑胶虫的概念是哪来的？对应的英文是什么？
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hot_hot_hot[使用道具]
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发表于 2012-10-7 13:00 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

黑焦虫完全是一种形态描述.
通过我的经历及大家的帖子可以看出这种形状的东西有完全不同的特性,有的可以和细胞共生,有的就会杀死细胞.
细胞状态不好的时候,背景就不太干净(有时可能是细胞死亡碎片,有时会是黑胶虫,还有就是支原体).但如果不管什么抗生素,什么浓度都杀不死, 而且细胞遇虫即死的话,支原体的可能性就很小.
原地蠕动的黑胶虫好象对细胞毒性不那么大,但那种横冲直撞的大虫就很恐怖了,搞不懂属于什么生物.
我们实验室经过一段时间的整顿(8mon),总算恢复了.还不知道是什么让它消失的,现在想起来简直心有余悸.连配制培养基的三蒸水在抽滤之前都消毒.
不过建议有虫灾的同志们,培养基血清赶紧封存.如果不同的实验室用同一品牌,同一批血清都出同样的问题,那就要找公司摆谈摆谈了.
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发表于 2012-10-7 13:00 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

应该注意是否是“黑胶虫”，看其是否做布郎运动，有的实验者高压消毒是不注意清除吸管内的碎屑（比如纱布屑）。最可能的因素是血清污染。尤其是自己制备的！
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发表于 2012-10-7 13:01 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

本人养细胞也有数年时间了，去年也有过这样的经历，原本挺好的细胞突然间多了很多小黑点，的确会动，甚至会翻筋斗，培养时间越长越多，如果坚持不传代，大约一周以后小黑点最终会占据绝对优势，而且换液是还不掉的，贴壁很牢，但可以减轻症状，最后我要说的是：它绝对不是布朗运动！！！因为10X的物镜就可以看到，也绝对不是支原体。
我的建议：
遇到这种情况，最好彻底放弃，我曾经努力过2个月，试过各种方法均以失败告终。
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发表于 2012-10-7 13:02 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我觉得黑胶虫不是一种有生命的生物体，在显微镜下可见黑胶虫要比细胞和细菌小许多倍，也不可能是病毒吧，可能只是做着布朗运动的微小渣滓之类的，我们以前血清中有黑胶虫时细胞长的歪瓜裂枣的，后来在滤培养液时将血清按照10%比例加入一起滤，几乎没有黑胶虫了。
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周伯通pp[使用道具]
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发表于 2012-10-7 13:03 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我觉得黑胶虫不是一种有生命的生物体，在显微镜下可见黑胶虫要比细胞和细菌小许多倍，也不可能是病毒吧，可能只是做着布朗运动的微小渣滓之类的，我们以前血清中有黑胶虫时细胞长的歪瓜裂枣的，后来在滤培养液时将血清按照10%比例加入一起滤，几乎没有黑胶虫了。

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真的吗???这样有用吗?? 血清很贵的啊!!
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