小中大我刚开始养原代胶质细胞时也碰到过此问题！现总结主要是以下方面的问题：
1.接种密度 不过你四个乳鼠接种一瓶应该不是这方面的问题
2.培养瓶最好用高压灭菌的1%的明胶处理过夜
3.细胞经过吹打消化过滤离心后，弃掉上清，加培养基吹匀再离心（两遍），这主要是除掉脂质
接种到培养瓶中24小时换液
我按此法养的原代胶质长得很好啊，以后可以多交流！
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谢谢你的经验，希望以后可以多向你请教。现在我想请教几个简单的问题，
1。你做的接种密度是多大，我通常是按1.5*106/ml密度接种，有题吗？
2。我用的是costar的一次性瓶子，是否可以不用包被？另外要包被的话，明胶，poly-L-lysine, poly-D-lysine三者间差别大吗？我看国外文献用poly-D-lysine的多。是不是可能用普通的玻璃瓶代替呢？
3。因为我觉得我养的细胞还不好，所以还没做鉴定，我传几张图上来，请帮帮我看一下有没有成纤维细胞污染，我对星形胶质细胞和小胶质细胞的形态也不能肯定，因为和网上搜到的图片不很一致。
