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标题:【求助】悬浮细胞怎么样才能有效的除去死细胞?

zsxan1990[使用道具]
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发表于 2012-10-8 14:23 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】悬浮细胞怎么样才能有效的除去死细胞?


最近在养B-9和TF-1细胞,都是悬浮的,却一直没有一个去除死细胞的方法.不知道是否能有办法除去已经死亡的细胞.谢谢
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wu11998866[使用道具]
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发表于 2012-10-8 14:25 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

离心时间短一点即可去出部分死细胞,试试看.
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vvmmoy[使用道具]
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发表于 2012-10-8 14:26 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

转速低一点，e.g. 800rpm
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zsxan1990[使用道具]
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发表于 2012-10-8 14:28 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
可是有时候，我也离心，大概就500rpm，但是效果也不好，去了上清液并加入新的培养液后，还是有很多的死细胞在里面。有时候不离心，直接将培养瓶树直放5小时，也不行。
这样死细胞老除不掉，似乎非常影响正常细胞的生长：（（
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flower-201[使用道具]
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发表于 2012-10-8 14:28 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我养的是血液肿瘤细胞，由于细胞生长迅速，换液时我只留少量细胞，如换液时留1ml，其余丢弃，再加入新鲜培养液10ml，这样能有效的除去死细胞碎片，而对细胞影响也比较小。
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zsxan1990[使用道具]
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发表于 2012-10-8 14:29 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

哦,谢谢
这次就这样试试.平时都是去掉大概5ML,剩下5ML,所以非常不好!
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misswu61[使用道具]
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发表于 2012-10-8 14:29 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我平是用的办法是：将培养瓶竖立放一段时间（50min左右），然后用吸管轻轻吸取上面1ml的细胞悬液，移入另一个新的已加培基的培养瓶中。
注意吸时不要混匀或震动原细胞液。另外勤换培养瓶。我原来也试过短时间低速离心，好象不管用。但我用上述办法传几代后还行。还有养细胞时血清浓度提高一点（百分之20左右）。试试看，祝你好运！
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fsdd817[使用道具]
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发表于 2012-10-8 14:31 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

这些方法都不是最好的，我们用ficoll分离，就像分离PBMC一样，先把细胞混匀，然后小心缓慢地把细胞加入到ficol中，1000g离心20分钟，收集位于ficoll和培养基之间的透明层，即为你的活细胞，我这样来处理我的淋巴肿瘤细胞，相信对你也一样可用。这是在存在大量死亡细胞的时候采用，如果死亡细胞不是特别多的话，就像楼上说的一样，换液勤一点。
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baidukk[使用道具]
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发表于 2012-10-8 14:31 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

不管你用什么办法都是很难除去死细胞，比较可行的方法：

多分装细胞，多换液，细胞死的时间长了自然会慢慢溶液。
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qqq111[使用道具]
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发表于 2012-10-8 14:32 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

用血清分离就可以了，
死细胞比血清密度小，活细胞比密度大，
如果都比血清重，………………？
那你的血清是掺水的，
找经销商打架去吧。
呵呵……
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