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标题:【讨论帖】细胞培养常用液体配制

园丁##[使用道具]
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【讨论帖】细胞培养常用液体配制


细胞培养时常常需要配制许多液体,
液体的配方虽然各种的差别,但是最基本的是相同的。
建立这个分板块希望可以给各位朋友带来方便。

如果对某一种液体的配制有不太清楚的地方,我们会尽量回复,同时希望各位朋友对其进行丰富。
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mickeylin[使用道具]
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请教前辈:配细胞营养液时,加双抗,谷胺酰胺,小牛血清,调PH值.有顺序吗?先加了小牛血清会起泡,对营养液有影响吗?
谢谢!
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生物迷[使用道具]
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小牛血清一般在培养液(配置的时候加好双抗,pH值等)抽滤后单独加,这样抽滤就比较简单。
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qianqin1977[使用道具]
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请教高手:请问配制D-HANKS液时,酚红必须加吗?再:各种成分比例如何?我查到3种组成比例(主要是Na2HPO4、NaH2PO4比例不同)。
配制EDTA时,酚红必须加吗?
能否把各种常见平衡盐、培养液的组成及具体配制方法写下来以让我们这些新手学习!多谢!急盼回复!
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whitesheep[使用道具]
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QUOTE:
原帖由 qianqin1977 于 2012-10-8 16:36 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

请教高手:请问配制D-HANKS液时,酚红必须加吗?再:各种成分比例如何?我查到3种组成比例(主要是Na2HPO4、NaH2PO4比例不同)。
配制EDTA时,酚红必须加吗?
能否把各种常见平衡盐、培养液的组成及具体配制方法写下来以让我们这些新 ...

我不是高手,谈点看法。酚红只是起指示酸碱度的作用,有当然较方便但没有也无妨,按照配方来PH值应该不会差很多,不放心的话可以测一下。有人甚至主张最好不用酚红,说是对细胞生长不利,有时也会影响一些检测结果(具体不祥,还望指教)
另外,组成可参见司徒老师的《细胞培养》,平衡盐溶液见P41,培养基见P50,由于条件有限无法上传,你可以在本版搜索一下,好象已有上传的
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fklo83[使用道具]
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酚红有雌激素样作用,所以如果做相关的实验最好不加。
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来自德国Max-Plank-Institute for Immunology实验室的完全培样基的配方:

RPMI 或DMEM 400ml,
100mM HEPES 10ml,
双抗混合液4ml(配制100倍储存液粉状冻存,终浓度100u/ml),
L-glumaine 8ml(200mM),
FCS 45ml,
1:1000稀释的2-ME 1.4ml
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小螺号[使用道具]
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请教,我的DMEM中是否应加谷胺酰胺呢,加多少,不加有什么影响
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ending[使用道具]
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我想确认一下,配edta可以不加酚红吗?
在EDTA中,酚红究竟起什么作用?
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园丁##[使用道具]
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QUOTE:
原帖由 ending 于 2012-10-8 16:38 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
我想确认一下,配edta可以不加酚红吗?
在EDTA中,酚红究竟起什么作用?

可以不加,
酚红作用如上面几位朋友所述!
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