细胞世界

不论有无胰岛上两层一般都应有细胞集中的絮状物，1）检查离心速度和时间，按其它文献标准做一般差别好象并不大。2）密度梯度值的设定，不知你用的什么样的密度梯度？3）纯化前洗涤时检测是否有胰岛，若前面本就没有，纯化也就没意文了。
　　配制的消化液和FICOLL需不需要消毒？若用过滤消毒，损失很多，好可惜，而且会导致浓度改变。若纯化后的胰岛需进一步培养检测功能或是作移植用那当然得消毒。消化液过滤消毒，FICOLL无法过滤，我们是分装后煮沸30分钟。
　　用双硫腙染色具体方法是怎样的？文献上说的不清楚，我昨天染了一次，没看见胰岛，我的双硫腙是这样配制的：10mg双硫腙+10mlDMSO配成储存液，没有稀释直接点到细胞涂片。我们以前是用5mg双硫腙+5mlDMSO＋氨水一滴配成储存液，用时用HANKS稀释20倍，还可以用。现在用无水乙醇配的感觉胰岛颜色更鲜艳些，5mg双硫腙+3ml无水乙醇＋浓氢氧化钠一滴+HANKS液12ml配成储存液，用时用HANKS稀释10-20倍感觉都可以。