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标题:【求助】磁珠筛选后细胞为啥不贴壁?

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发表于 2012-10-18 15:48 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】磁珠筛选后细胞为啥不贴壁?


我养的是原代内皮细胞,按说明书步骤操作(间接法),但磁珠筛选后细胞就是不贴壁,请教诸位这是何原因呢?
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yes4[使用道具]
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发表于 2012-10-18 15:49 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
你可考虑在细胞贴壁前加少量贴壁因子（AF)，37度30',再加入细胞，贴壁就没问题了。
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chuntian1983[使用道具]
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发表于 2012-10-18 15:49 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

培养人原代微血管内皮细胞时加一些贴壁因子(AF) ，可以促进内皮细胞的生长。
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发表于 2012-10-18 15:52 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
不好意思，再问一下何谓贴壁因子(AF) ？是否有专门的还是指明胶？在哪可以买到，价格如何？
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TAT[使用道具]
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发表于 2012-10-18 15:55 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
不好意思，再问一下何谓贴壁因子(AF) ？是否有专门的还是指明胶？在哪可以买到，价格如何？

————————————————————————————————————————————————————

Attachment Factor(AF)--贴壁因子、贴附因子：一种无菌的明胶覆盖培养皿表层时可促进人微血管内皮细胞的生长。

你可向附近的经销商询问货源和价格。
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发表于 2012-10-18 15:55 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我已经用进口明胶铺了培养瓶，不过是自己配制1％的浓度，请问是不是效果差点？
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发表于 2012-10-18 16:19 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我已经用进口明胶铺了培养瓶，不过是自己配制1％的浓度，请问是不是效果差点？

————————————————————

希望有所帮助
cuturl('http://bionon.nease.net/AF.doc')
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ha111[使用道具]
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发表于 2012-10-18 16:19 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
人微血管内皮细胞培养说明：
cuturl('http://www.cascadebio.com/pdfdocs/Cell%20Documents/doc20.7%20HMVECad.pdf')


人微血管内皮细胞培养液说明书（使用M131培养液）：
cuturl('http://www.cascadebio.com/pdfdocs/MSR%20Documents/doc16.8%20M131%20MVGS%20AF.pdf')

人微血管内皮细胞生长因子用：MVGS另加AF
cuturl('http://www.cascadebio.com/pdfdocs/MSR%20Documents/doc16.8%20M131%20MVGS%20AF.pdf')

详情请浏览：
cuturl('http://www.cascadebio.com/index.cfm?fuseaction=home.Content&CID=436')
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33号[使用道具]
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发表于 2012-10-18 16:20 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

多谢！可我养的是大鼠，不知种属不同是否能用？我继续做做看，若再不贴壁，就建议老板试试AF。
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vvmmoy[使用道具]
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发表于 2012-10-18 16:20 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我养的是小鼠的，可以贴壁！
关键注意三点，细胞活性（Trypan blue）及接种密度，生长因子（VEGF）也必不可少；
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