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标题:【讨论帖】一种细胞检测MTT法改良试剂测评

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【讨论帖】一种细胞检测MTT法改良试剂测评

日本同仁化学研究所研制出的MTT法改良试剂(CCK-8),在国外已被普遍使用并得到认可,它较MTT试剂更简便、省时、灵敏。大家觉得它怎么样?
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乌贼老弟[使用道具]
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XTT也是一种普遍接受的MTT改良试剂啊,能否提供些CCK-8的文献?
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可以,先提供部分文献目录,

References using Cell Counting Kit-8

1. Signals transducers and activators of transcription (STAT)-induced STAT inhibitor-1 (SSI-1)/suppressor of cytokine signaling-1 (SOCS-1) suppresses tumor necrosis factor -induced cell death in fibroblasts
Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 97, 5405 - 5410 (2000)

2. Apoptosis Signal-regulating Kinase 1 (ASK1) Induces Neuronal Differentiation and Survival of PC12 Cells
J. Biol. Chem., 275, 9805 - 9813 (2000).

3. Execution of Apoptosis Signal-regulating Kinase 1 (ASK1)-induced Apoptosis by the Mitochondria-dependent Caspase Activation
J. Biol. Chem., 275, 26576 - 26581 (2000).

4. Angiotensin-converting Enzyme Degrades Alzheimer Amyloid β-Peptide (Aβ); Retards Aβ Aggregation, Deposition, Fibril Formation; and Inhibits Cytotoxicity
J. Biol. Chem., 276, 47863 - 47868 (2001).

5. Glial cell survival is enhanced during melatonin-induced neuroprotection against cerebral ischemia
FASEB J.. 14, 307-1317 (2000)

6. BIT/SHPS-1 Enhances Brain-Derived Neurotrophic Factor-Promoted Neuronal Survival in Cultured Cerebral Cortical Neurons
J. Neuroche., 75(4), 1502-1510 (2000).

7. Shp-2 Specifically Regulates Several Tyrosine-Phosphorylated Proteins in Brain-Derived Neurotrophic Factor Signal
J. Neurochem., 74(2), 659-668 (2000).

8. Inhibitory Effect of Peptide-Free Forms of Advanced Glycation Products on the Proliferation and Extracellular Matrix Protein Production of Cultured Cells
J. Health Sci., 47(3), 296-301 (2001).

9. Transcriptional Activation of the Thyroglobulin Promoter Directing Suicide Gene Expression by Thyroid Transcription Factor-1 in Thyroid Cancer Cells
Cancer Res., 61, 3640-3646 (2001)

10. Nitric oxide-induced apoptosis in pancreatic β cells is mediated by the endoplasmic reticulum stress pathway
Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 98(19), 10845-10850 (2001).

11. Three vasoactive peptides, endothelin-1, adrenomedullin and urotensin-II, in human tumour cell lines of different origin: expression and effects on proliferation
Clinical Science, 103(48), 35S-38S (2002).

12. Induction of Neurite Extension and Survival in Pheochromocytoma Cells by the Rit GTPase
J. Biol. Chem., 277(23), 20160-20168 (2002).

13. An improved, simple screening method for detection of glucose-6-phosphate dehydrogenase deficiency
Tropical Medicine & International Health Volume 8 Issue 6 Page 569 - June 2003

14. Gene Transfection of H25A Mutant Heme Oxygenase-1 Protects Cells against Hydroperoxide-induced Cytotoxicity
J. Biol. Chem., 277, 10712 - 10718 (2002).

15. Human Thrombospondin 2 Inhibits Proliferation of Microvascular Endothelial Cells
Int. J. Oncol., 20, 339-342 (2002).
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milkdog[使用道具]
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MTT用于悬浮细胞的检测似乎不太准确,因为离心后去掉上清总会有一部分细胞被倒出来,这种CCK-8有没有什么改进?
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CCK-8试剂形成的Formazan为水溶性的,可以直接检测,故不必担心细胞会有损失,重现性较好。
若需要免费试剂,可将您的通讯地址,姓名,电话发到info@dojindo.cn
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summerxx[使用道具]
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是不用去除上清就可以检测么?能否把具体使用方法及其与MTT的不同点告诉大家
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CCK-8试剂可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。其基本原理为:该试剂中含有WST–8[其化学名称为:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐],它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪 硫酸二甲酯(1-Methoxy PMS)的作用下被细胞线粒体中的脱氢酶还原为具有高度水溶性的黄色甲 染料(Formazan dye)。生成的甲 物的数量与活细胞的数量成正比,因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析。
CCK-8试剂中已预先配入了进行细胞增殖和毒性分析所需的成分,无需再用缓冲液或培养基进行稀释;同时,CCK-8试剂无需任何放射性同位素和有机溶剂。因此,无需特别的技巧,就可使每一位使用者准确、快速地得到重现性好的实验结果。
★ 优 点
1、简 便 只需一步即可得到结果
2、省 时 毋需预制,即开即用
3、安 全 毋需放射性同位素和有机溶剂
4、快 速 省去了溶解除沉操作
5、灵敏度高 灵敏度高于MTT
6、重现性好 步骤少;无损失;结果准确
使用方法
细胞增殖分析
1、接种细胞悬液100μl于96孔板内,预先置于37℃,5% CO 2饱和湿度培养箱内培养。
2、在每个孔内加入10μl的CCK-8试剂。
3、把培养板放在培养箱内培养1-4小时*。
4、在450nm波长处测定吸光度,参比波长为600nm或600nm以上。
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xevin[使用道具]
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QUOTE:
原帖由 66+77 于 2012-10-19 11:25 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
CCK-8试剂可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。其基本原理为:该试剂中含有WST–8[其化学名称为:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐],它在电子载体1-甲氧基-5-甲基吩嗪 硫酸二甲 ...


你好CCK-8和MTT用法一样吗?
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tieshazhang[使用道具]
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回复 #8 xevin 的帖子

比MTT试剂方便!!!!!!
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caihong[使用道具]
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我今天收到了免费试用品,其实和mts差不多,但据说明上介绍比mts更灵敏,价格嘛,当然比较贵了,按照报价,大概做一孔是8毛多,如果你买3000孔的包装。
不过大家可以先试用一下,如果好,不妨就用吧,毕竟,好的实验结果最重要,有的老板也不在乎这些小钱的。
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