【求助】发酵罐小试问题

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标题:【求助】发酵罐小试问题

lixi559[使用道具]
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发表于 2012-10-20 15:16 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我做的是大肠杆菌的发酵罐，单位里的大罐已经在生产了，让我做5L的小罐，我也是第一次做，但总是做不到生产上的要求，想在这求助下。
生产上最后发酵液的pH在8.0以上，OD在5.5以上，可我现在将接种量提高了两倍，转数为250 rpm，风量10 SCFH（1 L/min=2.12 SCFH），最后发酵结束后，pH能达标，但是OD远远不行，想问下是不是风量太大了，我下面要怎么改善啊

fei1226com[使用道具]
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发表于 2012-10-20 15:17 资料个人空间短消息加为好友

小中大

小罐和大罐是有区别的，
你的大罐条件是什么样的？？
一般情况小罐的转速和风量应该是要比大罐高一些
关系到溶氧问题和保温稳定等情况

lixi559[使用道具]
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发表于 2012-10-20 15:19 资料个人空间短消息加为好友

小中大

QUOTE:

原帖由 fei1226com 于 2012-10-20 15:17 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
小罐和大罐是有区别的，
你的大罐条件是什么样的？？
一般情况小罐的转速和风量应该是要比大罐高一些
关系到溶氧问题和保温稳定等情况

大罐的转数40rpm，风量400m3/h，我已经提高很多了。溶氧开始在百分之七八十，之后会下降，温度用的跟大罐一样的，41℃。

kewanqi2011[使用道具]
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发表于 2012-10-20 15:19 资料个人空间短消息加为好友

小中大

接种量并不是越大越好，有时候菌体量太大反而会抑制菌体生长，保持原样试试。

lixi559[使用道具]
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发表于 2012-10-20 15:20 资料个人空间短消息加为好友

小中大

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原帖由 kewanqi2011 于 2012-10-20 15:19 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
接种量并不是越大越好，有时候菌体量太大反而会抑制菌体生长，保持原样试试。

之前试过，结果连pH也没能达标，pH最高升到7.5-7.6，之后就升不上去了。

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发表于 2012-10-20 15:20 资料个人空间短消息加为好友

小中大

加大氮源试试

lixi559[使用道具]
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发表于 2012-10-20 15:21 资料个人空间短消息加为好友

小中大

QUOTE:

原帖由 49888 于 2012-10-20 15:20 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
加大氮源试试

是不是因为我加大了接种量，营养不够了呀

u234[使用道具]
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发表于 2012-10-20 15:21 资料个人空间短消息加为好友

小中大

大罐的转数40rpm，风量400m3/h，我已经提高很多了。溶氧开始在百分之七八十，之后会下降，温度用的跟大罐一样的，41℃。...

______________________________________________________________________________________________________________

既然知道溶氧，把小罐的溶氧调到和大罐一样，转速风量都增加，但不能只增加一个，因为还要考虑菌承受的剪切力情况，剪切力过大也不利于生长，还有罐压要考虑，跟大罐保持一致，
楼主考虑下六楼说的情况，增加氮源是可以导致发酵液偏碱的，
接种量也是不要无限增大，在合理的范围就行了

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发表于 2012-10-20 16:35 资料个人空间短消息加为好友

小中大

溶氧达不到，pH初始设为7吧。转速设的太低了。最高转速设为1000转（大罐转速不能太高是因为剪切力及功率的问题，小罐不存在这个问题），不过不知道你的培养基是什么，防止起泡，要不时加消泡剂，通气量每分钟和发酵液体积比设为1:1或者通气量更高一点也可以。如果是玻璃罐体还要保证罐内压力为一个大气压（玻璃罐体不耐压，不锈钢的应该没多大问题），还有你的OD600怎么会只有5.5，这也太低了吧。拿普通的营养肉汤或者LB都不止这个啊。接种量5%就差不多了。

fei1226com[使用道具]
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发表于 2012-10-20 16:38 资料个人空间短消息加为好友

小中大

1、你的培养基配方？
2、你的培养工艺？包括搅拌、罐压、补料、pH调控、温度等都需要。
有了上述两个东东，才能给你确切的建议，只有问题，没法回答……

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