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标题:【求助】求星形胶质细胞细胞染色图片

PINK[使用道具]
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1
 

【求助】求星形胶质细胞细胞染色图片


万分火急,求星形胶质细胞(DAB显色系统)染色图片。
因为即将毕业,病理染出的图片十分不理想,无法作论文,非常恳请各位达人赐予。
最好是甩片的图片(细胞椭圆,细胞核偏位),DAB染色,在细胞浆、细胞膜均有分布。
谢谢,万分火急!!!
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yapuyapu[使用道具]
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这张Human Astrocytes图片,不知能否帮上忙!


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2012-10-22 20:19
69106274.snap.jpg (45.25 KB)
 
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PINK[使用道具]
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谢谢yapuyapu群友
我只是需要DAB染色的星形胶质细胞,来源是新生大鼠(3天内)。
还是感谢你的热心帮助,我还以为斑竹把帖子删掉了。
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superboy[使用道具]
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请问你这是用什么染色剂、什么激发块激发的啊?谢谢!
我以前做过FITC,用绿光激发,感觉没有你的效果好,不知道是什么原因。
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zwsyrt[使用道具]
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5
 
如果好看的话,还是荧光染色的好看!
这时我染的,GFAP

————————————————————————————————————————————————————————————————

主任,我是新手,昨晚做了出生1d小鼠的大脑皮层原代培养,今天发现细胞还是圆圆的,不贴壁细胞占了一半,就算是贴壁的,也是圆圆的,没有变形,不知道正常否?
我最终想获得星形胶质细胞,请问我现在应该作些什么?还有什么应该注意的问题?
谢谢!
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PINK[使用道具]
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本人由于试验条件所限(没钱),只能作普通染色的GFAP鉴定。所以还是希望各位能给我DAB染色的GFAP阳性星形胶质细胞照片。
先谢过了。
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7
 
但是如果您要星形胶质细胞,那么就不要管它了(甚至液体都没有必要换),一周后在看看,星形胶质细胞应该可以长出来了。

*注:培养液是10%FCS。

——————————————

请问培养液用哪种比较好?
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superboy[使用道具]
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多谢主任!我还有一个问题。

上次做得感觉不是很好,我想再做一次。
上次的protocol是这样的
1、取出生1d的小鼠,无菌取出大脑,弃除小脑和嗅球;
2、将两个大脑半球尽量剪小,用吸管吹打(较用力)
3、静置,待组织块沉下,吸出上清转入另一个离心管中
4、组织块再加入培养液,用吸管吹打
5、重复3
6、重复4、5
7、组织块基本吹散,静置3min,待组织碎片沉入管底,吸取上清,台盼蓝检活,最后以1*106细胞/ML培养

培养液为:DMEM+10%FCS+双抗

不知上面的protocol有什么不足之处?操作中还应注意哪些问题,请主任多多指点!
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avi317[使用道具]
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各位学长:
新手请求帮忙!
最近培养两次细胞,感觉长的很不理想,问题很多:
1、生长速度很慢;
2、取材时脑膜很难去掉;
3、星型胶质细胞数量太少;
4、杂质很多,以成纤维细胞为主;
5、48小时还发现一些细胞没有贴壁。
亟待高手指导,谢谢!
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join[使用道具]
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QUOTE:
原帖由 avi317 于 2012-10-22 20:25 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

各位学长:
新手请求帮忙!
最近培养两次细胞,感觉长的很不理想,问题很多:
1、生长速度很慢;
2、取材时脑膜很难去掉;
3、星型胶质细胞数量太少;
4、杂质很多,以成纤维细胞为主;
5、48小时还发现一些细胞没有贴壁。
亟待高手指导 ...

1。生长速度很慢;考虑接种密度。密度可高些。
2。取材时脑膜很难去掉;可用细些的镊子。鼠龄尽量小些。
3。星型胶质细胞数量太少;是总细胞数少还是仅星形胶质细胞太少?我想是前者。考虑消化不要过度,吹打不要过剧烈。
4。杂质很多,以成纤维细胞为主;与脑膜未去除有关。可采用预贴方法,成纤维细胞较易贴。
5。48小时还发现一些细胞没有贴壁。是正常现象。
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