【求助】救救我的THP-1细胞吧！已附图片

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标题:【求助】救救我的THP-1细胞吧！已附图片

pengke1983[使用道具]
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发表于 2012-10-23 13:46 资料个人空间短消息加为好友

小中大

从上海买回THP-1（单核细胞株）细胞已近一月，细胞状态越来越差，到现在还不能冻存。开始买回时，细胞还可以，可等我第一次传代后，细胞状态就不好了，细胞大小不一，碎片较多，还有许多成团，胞核内好多颗粒，而且细胞生长很不均匀，总是培养瓶底有一片细胞密密麻麻，而周围却稀稀啦啦，我开始总想等铺满瓶底再传代，可细胞总是长不满，而且培养夜颜色也几天不变黄。由于是悬浮细胞，现在培养瓶内细胞碎片越来越多，状态也越来越差，好多死的细胞团快。最近在高倍镜下看培养瓶内有很小的做布朗运动的颗粒，不知是否黑胶虫感染，但几天下来也没有明显增多。
唉，实验还没开始，800元买来的细胞就要玩玩，不知该如何向老板说，急死了。
不知哪位南京附近的朋友在养THP-1细胞，能否送我一瓶，救救我啊！
另：我有血管内皮细胞株、大鼠肾脏系膜细胞株可以交换啊！

idea2011[使用道具]
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发表于 2012-10-23 13:47 资料个人空间短消息加为好友

小中大

你把细胞好好洗洗，注意你选用的培养液是否最适合该细胞，在检查你所有的用液、器械是否无菌等。不知对你有无帮助。

mysmdbl[使用道具]
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发表于 2012-10-23 13:47 资料个人空间短消息加为好友

小中大

你的细胞应该是悬浮细胞吧
那你不要单纯看培养液的颜色情况，而是及时换液，一般不要超过3天，否则尽管液体不黄，但同样没有什么营养，那样的话细胞碎片会越来越多

近在高倍镜下看培养瓶内有很小的做布朗运动的颗粒，不知是否黑胶虫感染，但几天下来也没有明显增多。（这许多细胞都有，细胞密度大不明显）

还有就是你的培养液问题血清质量及浓度合适否，浓度不能太低，否则长的很慢
买来的时候是否用原带来的培养基养一段时间？

pengke1983[使用道具]
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发表于 2012-10-23 13:48 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我是买回后第二天传代的。
可现在我的细胞已经无法达到冻存的要求，我也查了好多文献，试了好多方法，可瓶内的细胞数量越来越少，变大破裂的细胞增多，我想是没救了，再买一株也要600元，唉不知该如何是好了，
哦，我是按照细胞库的要求配的培养基：1640里面添加hepes、碳酸氢钠、2－巯基乙醇、丙酮酸钠，10％FCS,不过原来细胞库用的血清是进口的，而我回来后用的是杭州四季青的（经56度灭活补体），不知血清是否影响。
不知有没有正在养THP-1细胞的朋友，给点建议，THP-1是否真的很骄气？
能否发点图片看看？
急盼！！！

yes4[使用道具]
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发表于 2012-10-23 13:48 资料个人空间短消息加为好友

小中大

你去搜gogogo发的帖子,可能会有点帮助.
另外,既然这么贵的细胞,还是用进口血清好一些.

pengke1983[使用道具]
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发表于 2012-10-23 13:48 资料个人空间短消息加为好友

小中大

有没有培养THP-1细胞的战友把THP-1的图片发给我看看啊，急啊！

owanaka[使用道具]
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发表于 2012-10-23 13:49 资料个人空间短消息加为好友

小中大

[img][/img]

附件

2012-10-23 13:49

13642778.jpg (40.35 KB)

owanaka[使用道具]
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发表于 2012-10-23 13:49 资料个人空间短消息加为好友

小中大

PMA刺激后[img][/img]THP-1要用好的进口血清！国产的不行。不要丧失信心，改用好的血清，最好1640也用进口配好的，多换几次液，会好转的

附件

2012-10-23 13:49

44013115.jpg (43.39 KB)

pengke1983[使用道具]
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发表于 2012-10-23 13:50 资料个人空间短消息加为好友

小中大

太谢谢了。唉，当时就是因为节省金费才没舍的用进口的血清。不知到现在换还来的及吗？今天看了一下，几个培养瓶里总是中间一小块细胞比较多，但高倍镜下看细胞已经比较老了，而且已近7天没传代了。不知希望如何。看了你的图片很是羡慕，请问你用的是何种血清？你是如何换液的？一般几天就可以铺满瓶底了？
l我的细胞前后拿回来已一月，还没有冻存，现有培养瓶里的比较老了再用进口血清不知能回复状态吗？

ffooll[使用道具]
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发表于 2012-10-23 13:50 资料个人空间短消息加为好友

小中大

离心，把细胞放在24孔板中，使细胞密度增大。

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