光谱分析

最近本人在测黄酮，我想问最后的那个末端吸收怎么会这样的，还有时候会出现负吸收的。改溶剂都好几次，但是还不成功改善它的峰型，溶剂用的是甲醇，乙醇，氯仿，请前辈们给小弟献个计。用的是岛津2550.

我们实验室也是这个型号的紫外。我的体会是：如果图形很难看，试着稀释一下，或浓缩一下。另外一点就是：要先用试剂空白调零，

仪器所做的事情只是给出信号响应，然后根据符合朗伯-比耳定律的公式来计算吸光度。
吸光度测试的物理依据是朗伯比尔定律，谱图不好或是超出范围的根本原因是测试的样品不在其适用范围。
实际上测试溶液时 发生偏离或是严重不符合朗伯比尔定律的情况是很正常的。

请根据朗伯比尔定律的适用范围来分析被测试的样品溶液。
朗伯-比耳定律成立的前提 ：
        (1) 入射光为平行单色光且垂直照射.（现在大多是用前进样测试方式，都是复色光照射样品之后再分光）
　　(2) 吸光物质为均匀非散射体系.
　　(3) 吸光质点之间无相互作用.
　　(4) 辐射与物质之间的作用仅限于光吸收,无荧光和光化学现象发生.

先谢过各位热心人士，这个我试过了，都稀释过，但是图谱末端还是会出现这种锯齿波动很大的东西，已经摸索了好几天了，还是没果。我都偿试过在控制在0.2~0.7的范围内，不过结果还是一样。 有些时候在图谱出现负吸收，不知道是不是溶剂跟黄酮作用，而且我做的步骤是按照文献的做，不会是文献造假吧。

最好用流动相作溶剂啊，不过要是你的流动相溶不了的话就考虑下其它的了，出现的负吸收一般都是溶剂的峰，相对流动相吸收弱而出现的倒峰。

参比溶液的选择不正确，只能作这样的大致分析，因为溶液的组成、来源、测定波长及是否经过显色处理等问题都未告知。

只可能这样了，但是我用的参比溶液是药物以外的体系，用于药物的对照只是用了乙醇或者是甲醇，理论上时正确的，但实际得到的图谱不理想。先谢过miracle给我了一个指导方向~~

如果选择的空白没有问题，样品的浓度没有问题的话，最好对于仪器进行校正，不行换台仪器试试。

空白出现问题了，继上次的分析了大家的想法的，我就针对参比溶液进行了分析，本人是在做亚硝酸钠-硝酸铝对黄酮的显色测定。过程是加亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠，显色。配完空白之后跑基线，直接用两个空白测，出现上述图谱末端吸收的杂峰，然后用乙醇作参比，分别单独的对三种现配的亚硝酸钠，硝酸铝，氢氧化钠测定，图谱正常。于是本人就怀疑反应不够充分，放置一段时间后测定，结果没变。还是得跟大家请教，呵呵~~

你做的是紫外还是色谱啊，2550好像是紫外分光光度计的型号啊？