细胞世界 » 讨论区 » 经验共享 » 【求助】关于1640液的配置

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 30  1/3 123››
 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴
打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:【求助】关于1640液的配置

tie8[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 75844
精华 0
积分 442
帖子 543
信誉分 100
可用分 3571
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-28
状态 离线
1

发表于 2012-10-27 13:53 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】关于1640液的配置

我是细胞培养的新手，这一段时间我配置1640液时遇到一个奇怪的现象，我用的是Gibco公司的1640粉，在配好后过滤除菌以后如果直接放在37度恒温箱中就很好，但如果放在-20度保存以后，在解冻后溶液中出现白色沉淀，但也不是染菌，不是是怎么回事，希望高手指教啊，我已经连续配了四次了，都是这样，好痛苦啊
顶部
sunnyB[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 77335
精华 0
积分 581
帖子 862
信誉分 100
可用分 5059
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-16
状态 离线
2

发表于 2012-10-27 13:58 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我一直在用1640培养基，不过用的是hyclone的。配好过滤后放入4度冰箱保存就可以了，所以根本不会出现上述现象。我们一次至少配2升，用封口膜缠一下放到冰箱慢慢用，用几个月没问题的。
顶部
misswu61[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 79547
精华 0
积分 747
帖子 774
信誉分 100
可用分 4691
专家分 100
阅读权限 255
注册 2011-12-13
状态 离线
3

发表于 2012-10-27 13:59 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

哪位大侠帮帮我？我配的1640培养液总是偏碱，细胞两天后死亡。能否告诉我你们是怎么配的么。是不是我配置的方法错误，因为我用的DMEM培养液养的细胞很好。
顶部
04906[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 73544
精华 0
积分 599
帖子 858
信誉分 100
可用分 5155
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-9-24
状态 离线
4

发表于 2012-10-27 14:08 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我们的1640和DMEM（均为Gibco产品）配方，另加HEPES 25mmol/L，谷氨酰胺2mmol/L，丙酮酸钠1mmol/L，碳酸氢钠2 g/L。不会偏碱的。在有效期内可长期冻存，未发现过沉淀。用时加双抗，用5.6％碳酸氢钠调PH至7.4。
顶部
skytree[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 76459
精华 0
积分 372
帖子 444
信誉分 100
可用分 3026
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-5
状态 离线
5

发表于 2012-10-27 14:09 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

Gibco公司的1640粉在配置的时候加入2.0克NacHo3一般PH值就在7.0-7.2，不用调的，但我在细胞传代的时候用hepes和碳酸氢钠一起来调PH值
顶部
中国特色[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 74504
精华 0
积分 223
帖子 185
信誉分 100
可用分 1671
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-11
状态 离线
6

发表于 2012-10-27 14:09 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
说一句:大家检测PH值用的是什么?
如果是PH计的话,是不是都正规操作了??
顶部
yes4[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 77377
精华 0
积分 764
帖子 1145
信誉分 101
可用分 6575
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-11-16
状态 离线
7

发表于 2012-10-27 14:09 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
配制的培养基是不能放在-20度保存的，因为培养基中的有些成分是不能在-20度放的，一般说明书上都有提示，可能你没有看，另外，要加HEPES和碳酸氢钠调PH值，一般过滤除菌后PH值会上升0.1－0.2，调节PH值时应注意。
顶部
skytree[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 76459
精华 0
积分 372
帖子 444
信誉分 100
可用分 3026
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-5
状态 离线
8

发表于 2012-10-27 14:10 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我们已经多年都这么作的，没有问题，可以放在-20度的
顶部
大白菜[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 76277
精华 0
积分 230
帖子 220
信誉分 100
可用分 1831
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-3
状态 离线
9

发表于 2012-10-27 14:10 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
说一句:大家检测PH值用的是什么?
如果是PH计的话,是不是都正规操作了??

——————————————————————————————————————————

用试纸啊，我们的pH计好像都不准，同一杯液体每次测都不一样的值，所以干脆用试纸了。
顶部
fei1226com[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 79957
精华 0
积分 599
帖子 898
信誉分 100
可用分 5286
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-12-18
状态 离线
10

发表于 2012-10-27 14:10 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我们的1640和DMEM（均为Gibco产品）配方，另加HEPES 25mmol/L，谷氨酰胺2mmol/L，丙酮酸钠1mmol/L，碳酸氢钠2 g/L。不会偏碱的。在有效期内可长期冻存，未发现过沉淀。用时加双抗，用5.6％碳酸氢钠调PH至7.4。

那1640需要通二氧化碳么？我的1640培养液放在4度就会慢慢偏碱，是不是下次用时还要用碳酸氢钠调ph .
另外我也是用试纸测ph的。有时用眼看就可以了。培养液颜色为红色，ph在7到7.2之间
顶部
 30  1/3 123››