【求助】看看这是凋亡小体吗

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标题:【求助】看看这是凋亡小体吗

mickeylin[使用道具]
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发表于 2012-10-27 14:54 资料个人空间短消息加为好友

小中大

30Gy照射后三天到四天，鼠B16细胞，碧云天凋亡试剂盒hoechst33258染色，请问其中的泡泡状的东西是什么？

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2012-10-27 14:54

31281565.jpg (18.85 KB)

mickeylin[使用道具]
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发表于 2012-10-27 14:54 资料个人空间短消息加为好友

小中大

再看一张

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2012-10-27 14:54

25777812 (1).jpg (22.3 KB)

mickeylin[使用道具]
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发表于 2012-10-27 14:55 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我问过碧云天的技术支持，他们无法解释，因为别云天是国外的一些留学人员办的，所以懂得人都在国外。放在这里请大家看看，共同交流一下。有没有人用过他们的凋亡试剂盒呢？我染出来的核没有他们附的照片那么典型。大家的染色程度都差不多。偶尔几个致密的核都是一对一对的，像是刚分裂的两个核，不像凋亡，比如下面这个图，我的细胞照到30Gy应该是有凋亡细胞出现的

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2012-10-27 14:55

31601044.jpg (22.92 KB)

mickeylin[使用道具]
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发表于 2012-10-27 14:56 资料个人空间短消息加为好友

小中大

这是试剂盒内附的图

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2012-10-27 14:56

40934829.jpg (1.67 KB)

orangecake[使用道具]
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发表于 2012-10-27 14:56 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我作的细胞凋亡时也有这种现象，我觉得是细胞处于细胞核开始裂解，已经过了细胞核浓缩的时期了。试剂盒里所配的图是细胞核浓缩期的，如果你还不确定的化，可以用免疫组化方法检测凋亡细胞中的相关蛋白的表达，如CASPASE，P53，BAX等，当然和你的细胞具体特征有关。

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发表于 2012-10-27 14:57 资料个人空间短消息加为好友

小中大

如果是过了浓缩期，那么浓缩期到底是什么时候？我在照射后即刻、24h、48h
都染色做过，染色没啥差别，也没发现太多浓染的核，只有少数几个，而且形状以圆形为主，感觉“太规则“，呵呵，总之做不到试剂盒内的那种效果。
希望更多的高手来指导

orangecake[使用道具]
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发表于 2012-10-27 14:57 资料个人空间短消息加为好友

小中大

试剂盒里的照片一般都是很典型的照片，说不定也是做了多少遍才有那么好的效果。
只要和你做的相应阴性，阳性对照相比有意义就行了。

mickeylin[使用道具]
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发表于 2012-10-27 15:06 资料个人空间短消息加为好友

小中大

试剂盒里的照片一般都是很典型的照片，说不定也是做了多少遍才有那么好的效果。
只要和你做的相应阴性，阳性对照相比有意义就行了。

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关键问题就是和阴性对照没啥区别。这几天用过氧化氢诱导凋亡，也还没做出比较典型的片子。还在继续摸。真是辛苦！不知道，各位有没有比较典型的调往小体的图片。贴出来学学也好。

gmjghh[使用道具]
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发表于 2012-10-27 15:07 资料个人空间短消息加为好友

小中大

就是啊，效果不一样啊

minran_1980[使用道具]
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发表于 2012-10-27 15:07 资料个人空间短消息加为好友

小中大

这是我们实验室最近用碧云天凋亡试剂盒hoechst33258作的比较典型的凋亡图片：

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2012-10-27 15:07

88482465.jpg (45.86 KB)

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