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标题:【求助】流式检测端粒长度,结果可信吗?

lixi559[使用道具]
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发表于 2012-10-27 16:54 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】流式检测端粒长度,结果可信吗?

流式检测端粒长度,结果可信吗?

近期,用DAKO的KIT检测药物处理后的细胞端粒长度变化,呈很明显的量效关系,

但是作用时间只有四个小时,端粒的信号降低了很多;总觉得这样的结果不可能,

有没有高手做过这个实验,指点一二.
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caihong[使用道具]
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发表于 2012-10-27 16:55 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

请问哪里能做流式检测端粒酶长度?试剂从哪个公司购买?多谢
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qumm1985[使用道具]
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发表于 2012-10-27 16:55 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

DAKOTelomere PNA kit/FITC for Flow Cytometry ,Cat NO.K 5327,
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小野花[使用道具]
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发表于 2012-10-27 16:55 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
几个问题请教一下：

1.测端粒的长度用roche的kit好用吗？它是用 sounther-blot的方法做的。

2.您当初选择用DAKOTelomere PNA kit/FITC for Flow Cytometry ,Cat NO.K 5327,
一定有您的理由，能告诉我们，让我们参考一下吗？

不胜感激！！
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zranqi_1[使用道具]
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发表于 2012-10-27 16:56 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

目前来说，测定端粒长度有以下几类方法;
一是SOUTERN的方法，二是应用探针进行原位杂交，然后用相应软件测定信号强弱来确定端粒长度，三是流式方法，原理就是原位杂交，只是用流式细胞仪来测定端粒荧光信号的强弱。
ROCHE的KIT 是SOUNTERN的方法，做起来很不错。就是比较贵，大概 50TESTS,4900RMB；应用流式的方法，是为了证实SOUNTERN方法的结果，比较简单,但是对于其结果，我们还不能完全的确认。毕竟是比较新的方法，而且相对便宜些,2800RMB。
希望这些信息对你有所帮助
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lixi559[使用道具]
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发表于 2012-10-27 16:56 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

谢谢你的回复！你用流式的方法，与SOUNTERN方法的结果一致性如何？
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owanaka[使用道具]
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发表于 2012-10-27 16:56 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
关于两者结果是否一致的问题，我们在试验中也进行了比较，基本一致。
但是流式测定方法中，如果不使用已知端粒长度的阳性细胞1301，则测定的是端粒的相对长度，无法得到端粒的实际长度（Kb)．SOUTHERN 的方法则可以根据KIT中的两种对照，通过分析软件得到实际长度。因此，两者只能在变化趋势上进行比较。
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shenkunjie[使用道具]
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发表于 2012-10-27 16:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

你有没有同步检测端粒酶活性呢？这也是一个很重要的指标，最好同时做，结果有说服力。
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lixi559[使用道具]
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发表于 2012-10-27 16:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

4小事端粒长度有变化可能是有点太快了，一般细胞每分裂一次，端粒才缩短一定的长度。
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shenkunjie[使用道具]
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发表于 2012-10-27 16:58 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 lixi559 于 2012-10-27 16:57 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

4小事端粒长度有变化可能是有点太快了，一般细胞每分裂一次，端粒才缩短一定的长度。

你提的问题，我考虑过了，这么短时间就缩短，说明很可能是不依赖于复制周期的。
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