【求助】求教CHO细胞的培养

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标题:【求助】求教CHO细胞的培养

owanaka[使用道具]
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发表于 2012-10-30 10:57 资料个人空间短消息加为好友

小中大

各位大侠：小弟最近在培养CHO细胞，所用的是DMEM（含10%FCS),但是细胞的状态总是不好，恳请有养殖经验的侠客指点迷津

IAM007[使用道具]
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发表于 2012-10-30 10:58 资料个人空间短消息加为好友

小中大

QUOTE:

原帖由 owanaka 于 2012-10-30 10:57 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
各位大侠：小弟最近在培养CHO细胞，所用的是DMEM（含10%FCS),但是细胞的状态总是不好，恳请有养殖经验的侠客指点迷津

哈哈。我觉得少放点血清比较好，呵呵。

qqq111[使用道具]
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发表于 2012-10-30 10:59 资料个人空间短消息加为好友

小中大

生长时用10%FCS,等细胞铺满瓶底后改用5%维持

redbutterfly[使用道具]
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发表于 2012-10-30 11:35 资料个人空间短消息加为好友

小中大

CHO应该在F12培养基中培养，血清选择FCS.我养过的，应该没有问题。

qqq111[使用道具]
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发表于 2012-10-30 11:37 资料个人空间短消息加为好友

小中大

培养基为F12

cj_mondy[使用道具]
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发表于 2012-10-30 11:37 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我们的CHO细胞是用F12培养液＋5％小牛血清＋双抗培养的。
CHO很皮实，很好养，看来你给它的养料太多，营养过剩了
你换培养液试一下吧，祝好运。

flower-201[使用道具]
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发表于 2012-10-30 11:38 资料个人空间短消息加为好友

小中大

用IMDM液加10%FBS。

yhz1973[使用道具]
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发表于 2012-10-30 11:39 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我的CHO是从别人那拿来的,一开始用的是他们的培养基,第一次传代（应该没有消化
过度，用０.０２％ＥＤＴＡ，消化４min）后改用自己的培养基,可是细胞发生了可怕的形
态变化,什么形状的都有,长形的,圆形的,不规则的,而且细胞变得点点渣渣的,瓶内有许多
碎片和小渣子．
　　　培养基的ＰＨ和他们的一样，配方也没改变（DMEM+10%FBS），怎么会这样啊．
　　　着急死了，也不知道什么原因！
　　　养过ＣＨＯ的高手们赶快指点一下吧．
　　　谢谢！

小野花[使用道具]
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发表于 2012-10-30 12:16 资料个人空间短消息加为好友

小中大

你的是CHO/dhfr-还是CHO－K1？
如果是K1，就用10％FBS＋DMEM没问题；如果dhfr-，就要添加次黄嘌呤、胸腺嘧啶和MTX。
我刚开始养的时候也是碰到类似的问题，慢慢养，感觉上来后，你想它长得忙一点都难；不过CHO容易受支原体污染，要小心；实在不行，就留意一下培养箱的温度和CO2的浓度有没有问题，我就吃过一次这样的亏。
有一点比较重要的是：如果你的细胞活力不是很好的时候，传代的密度尽量大一些，CHO有一定的密度依赖性，最好是1传2就可以了，如果活力好的话，1传10都没问题。

yhz1973[使用道具]
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发表于 2012-10-30 12:16 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我的是CHO-K1.
谢谢你!
那它应该不会die掉吧,要不然,我连努力慢慢养的机会都没有了,

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