【求助】细胞是不是污染啊？

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标题:【求助】细胞是不是污染啊？

tuuu2[使用道具]
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发表于 2012-11-2 11:33 资料个人空间短消息加为好友

小中大

培养内皮细胞.
取回细胞株的途中,培养液有外漏.
用的是DMEM/F12+小牛血清,换液六小时以后,细胞生长良好,培养液外观无混浊,镜下观细胞贴壁可,间隙小,成鹅卵石样排列.
但十二小时以后,培养液变黄绿色,混浊.镜下观培养液中有大量悬浮成团物质,怀疑有污染.但是换液再隔六小时,细胞又铺展贴壁.
到底是不是污染

tuuu2[使用道具]
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发表于 2012-11-2 11:33 资料个人空间短消息加为好友

小中大

培养液最多只能用一天，好头痛！

tuuu2[使用道具]
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发表于 2012-11-2 11:34 资料个人空间短消息加为好友

小中大

急救措施：
弃旧培养液，用PBS加庆大霉素按1000U庆大/1MLPBS清洗细胞。加入新鲜的培养液DMEM/F12+小牛血清。六小时以后，细胞生长良好。十二小时以后，又出现上述情况。头痛！
第二次急救：弃旧培养液，PBS洗两遍，加入培养液，加庆大霉素，按5000U庆大/1ML培养液。加入庆大以后，培养液由玫红色变的淡黄。
依然没有抢救成功。
为什么六小时和十二小时出项的情况不一样？

u234[使用道具]
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发表于 2012-11-2 11:34 资料个人空间短消息加为好友

小中大

从怀疑污染到现在几天了？如果超过3天，偶认为没有污染。如果是污染了，任你怎么换液，到第三天的时候肯定是被大量细菌覆盖了的，而且，细胞如果污染了，就不要进行什么急救了，没有用的！你这种情况，我觉得是不是细胞太密了，培养液很快变黄，说明细胞代谢很快，营养不够了就会脱落下来。

tuuu2[使用道具]
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发表于 2012-11-2 11:34 资料个人空间短消息加为好友

小中大

到昨天为止已经一个星期了。细胞的密度过大我也考虑过。
但是急救了一个星期，它仍然在生长，就是很快就会被成团的漂浮物覆盖。
我不清楚到底是细菌还是死细胞。

any333[使用道具]
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