【求助】心肌细胞污染了？

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标题:【求助】心肌细胞污染了？

yonger[使用道具]
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发表于 2012-11-2 11:49 资料个人空间短消息加为好友

小中大

请高手指教：
新手上路。最近养原代心肌细胞，刚消化下来的心肌细胞之间有很多小黑点，远小于细胞，快速在原地运动（布朗运动？）。然后培养30分钟，1小时时观察，有很多心肌细胞伸出伪足，很高兴。3小时候发现运动的小黑点大增，心肌细胞明显受影响，伪足不再继续伸张。24小时细胞全部死亡，未有贴壁的，培养液仍很清亮，不象细菌污染。小黑点好像钻进心肌细胞及红细胞，在细胞内，趴在细胞上的不动，细胞之间的动。请问这是什么污染？怎么解决？急，急，郁闷！
难道是黑焦虫吗？这与别的贴子描述的黑焦虫有点相似，但它只在原地，不游动。
有一次取乳大鼠血稀释后入培养瓶立即观察，发现大量此运动的小黑点。
急等高手回复。
谢谢！

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发表于 2012-11-2 11:49 资料个人空间短消息加为好友

小中大

兄弟：你这个现象我也遇到了（我养的是sp2/0），开始我以为是细胞碎片，通过离心后，在放到新的培养液中，开始的时候还好。过几个小时就会张满很多黑黑的能游动的小物体。接种的细胞越少，这个东东的越多。我使用了很多方法也没什么办法，后来请教北京的一个老师，他告诉我是杆菌污染了,没救了，我说什么原因，他说操作上可能有问题或是抗菌素失效了，后来我复苏了一下细胞，就没有在发现这些问题了。后来我们做了染色，和培养，把细胞培养也接种到细菌的培养基上后，在第二天就发现里面有菌落形成，后来几天发现他是一下颜色发黄的细菌。当然我是仅仅做细胞培养很短的时间。对微生物也不是很了解，希望这些经验能给你帮助。

yonger[使用道具]
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发表于 2012-11-2 11:50 资料个人空间短消息加为好友

小中大

首先非常感谢楼上
可是我做的是心肌原代培养，每次作都这样。感觉操作也很过关。我的小黑点仅在原地，或极小范围内高速运动。不游动。我们这里做骨髓的，P12细胞的都出现了这种情况。怀疑交叉污染？但是我请了两个别的实验室的同学（一个在别的城市，一个在其他单位做实验）过来看，他们出现的情况和我这里一样。
迷惑？
不过这两天用其他方法可解决部分问题。贴在cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=66&id=1180697&sty=1&tpg=1&age=0')

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发表于 2012-11-2 11:51 资料个人空间短消息加为好友

小中大

哥们：我把培养瓶里面的培养液和一般的大肠杆菌做了革兰氏染色：结果见图。由于疏忽把大肠杆菌的图片搞丢了，就剩下细胞培养液的图片（10×40），其中画圈的部分中，内部杆状的东西很多，而且很规则但和大肠杆菌的染色不同，它的染色很少。杆菌的则发深红。是不是不能被染色，由于当时是出于好奇就看了看没有让老师看，但跟我发的电镜的那个杆状的东西很相似，但不知道倍数是否相符（这个没有详细想过，但电镜中的那个一定是杆菌这个已经由微生物老师看过）