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标题:【求助】冻存液怎么配置?

cj_mondy[使用道具]
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【求助】冻存液怎么配置?


有些书上说,可以用50%的小牛血清(RPMI1640)+DMSO,但问了其他一些同学,他们就直接用100%小牛血清+DMSO, 我刚接触细胞培养,请问各位前辈,这个小牛血清浓度不同,有什么区别么??
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冻存液首先关键在于冷冻保护剂,一般常用DMSO此类渗透性保护剂,一般是以9份小牛血清或细胞培养液与1份的DMSO混合而成,现配现用或配置后放入普通冰箱冰盒内冷冻保存,使用前于室温水浴融化。关键在于DMSO的终浓度为10%,对于普通细胞来说,小牛血清浓度似乎高点越好,但没有这个必要,用细胞培养液即可。
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is2011[使用道具]
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我们都是60%小牛血清+30%DMEM+10%DMSO,效果良好.
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xue258[使用道具]
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我们实验室一直是1分DMSO+9份培养液,效果一直不错,容易配置,操作简单
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yueban-1147[使用道具]
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right. actually 5%-10% DMSO in FCS-containing medium is enough.
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cj_mondy[使用道具]
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那如果DMSO浓度稍微高了一点,大概13%,对细胞冻存有没有什么影响??
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vcve[使用道具]
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应该没有影响,我曾经用过20%的DMSO,活化也没影响,不过后来一直用10%的
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jkobn[使用道具]
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你们的小牛血清太浪费了,我们实验室都是30%小牛血清+60%DMEM+10%DMSO,从没出现问题.
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喇叭花[使用道具]
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20%小牛血清10%DMSO即可,注意冷却配好的冻存液。
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66+77[使用道具]
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细胞冻存,复苏时提高存活率的关键是冻存时温度降低的速度,而不是冻存液。如果有程序降温仪的话,就只是用培养基加DMSO的冻存液,复苏时的存活率也在80%以上。
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