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标题:【求助】D-Hanks液中Na2HPO4的用量?

阿k[使用道具]
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发表于 2012-11-6 15:36 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】D-Hanks液中Na2HPO4的用量?


到底D-Hanks中Na2HPO4的用量为多少?
薛庆善<体外培养技术与原理>中配方为Na2HPO4.7H2O 0.09g/L
司徒镇强<细胞培养>中配方为Na2HPO4.H2O 0.06g/L
经换算,mol数是不同的
我在园里搜一下,也不统一,有说Na2HPO4.7H2O 0.09g/L的,有说Na2HPO4.7H2O 0.06g/L,所以搞不清,到底用量为多少?
请指教!
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wu11998866[使用道具]
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发表于 2012-11-6 15:37 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

Na2HPO4.12H2O 0.134g/L
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nut6694[使用道具]
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发表于 2012-11-6 15:38 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
薛庆善<体外培养技术与原理>中配方为Na2HPO4.7H2O 0.09g/L，
司徒镇强<细胞培养>中配方为Na2HPO4.H2O 0.06g/L，
换算出来是一样的，请再仔细算一下！
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nut6694[使用道具]
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发表于 2012-11-6 15:39 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
再算

=======================

Na2HPO4.12H2O 0.134g/L

================

，还是一样的！
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ritou1985[使用道具]
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发表于 2012-11-6 15:54 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

Na2HPO4.H2O： 159.98（分子量） 0.06g/L（用量） 0.375 （mmol数）
Na2HPO4.7H2O： 268.07（分子量） 0.09g/L （用量） 0.336 （mmol数）
Na2HPO4.12H2O： 358.15
注：Na：22.99，H：1.008，P：30.97，O：16.00，Na2HPO4：141.96
按Na2HPO4.H2O算，Na2HPO4.12H2O用量为 0.375×358.15＝0.134g
按Na2HPO4.7H2O算，Na2HPO4.12H2O用量为0.336×358.15＝0.120g

Na2HPO4.H2O，Na2HPO4.7H2O 摩尔数不一样，你算的0.134g是根据Na2HPO4.H2O折算的！有的资料还说Na2HPO4.7H2O 0.06g/L，到底应该哪个对呢？

另：做细胞的消化时，用D-Hanks还是用Hanks配胶原酶1，薛庆善<体外培养技术与原理>和司徒镇强<细胞培养>也是不统一的：
薛庆善<体外培养技术与原理>中说，细胞分散受Ca和Mg离子的影响，Ca和Mg离子有使细胞凝集的作用，宜用D-Hanks或PBS配。
司徒镇强<细胞培养>说胶原酶1的消化作用不受Ca和Mg离子的影响，可以用BSS配。
两者角度不同，到底用哪个配呢？
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发表于 2012-11-6 15:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

准确地讲，应该为0.34 mM：
Na2HPO4.H2O： 159.98≌160（分子量） 0.054g/L≌0.06g/L（用量）；
Na2HPO4.7H2O： 268.07≌268（分子量） 0.091g/L≌0.09g/L （用量）；
而Na2HPO4.7H2O 0.134g是根据Na2HPO4.H2O折算的。
另外，我们做原代细胞分离时，用HBSS配collagenase.
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ritou1985[使用道具]
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发表于 2012-11-6 15:57 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

谢谢你的不厌其烦，0.054g/L≌0.06g/L，看来D-Hanks缓冲液里的Na2HPO4用量并不是非常准确，我也不用这么细究了！
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nut6694[使用道具]
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发表于 2012-11-6 15:58 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
0.054g/L≌0.06g/L
Sorry，我的意思是配1L的话要称54 mg，需要精确到mg（读到0.1 mg），有时可能忽略了（或者条件限制）。
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阿k[使用道具]
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发表于 2012-11-6 15:58 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

那么配10×D-Hanks溶液时呢？540mg和600mg？重要的是配方的准确性，有时不同资料配方有些小出入，那时比较头疼！
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nut6694[使用道具]
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发表于 2012-11-6 15:59 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

Na2HPO4.H2O 0.34 mM
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