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标题:【求助】用胰酶+edta消化后要离心吗

c86v[使用道具]
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发表于 2012-11-7 11:17 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】用胰酶+edta消化后要离心吗


用pbs洗1下，再加全培行吗。离心的话不是浪费掉培养基吗？
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xue258[使用道具]
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发表于 2012-11-7 11:18 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
洗一下吧，对细胞好的。你对细胞好，它也会给你回报的。
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orangecake[使用道具]
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发表于 2012-11-7 11:18 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
应该离心，EDTA对细胞的贴壁有影响，有时消化我都不用EDTA。
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bs4665[使用道具]
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发表于 2012-11-7 11:19 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

不用离心，离心麻烦而且增加污染机会，只要消化到呈雾状时倒掉胰酶，接着操作即可。
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qhyu[使用道具]
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发表于 2012-11-7 11:19 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

没必要加EDTA去消化，加胰酶就可以了。
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66小飞侠[使用道具]
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发表于 2012-11-7 11:21 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
不用离心，我试过。离心有时会加重细胞破损 。
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zhenxin[使用道具]
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发表于 2012-11-7 11:21 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
总结一下吧，呵呵！  
消化过程：吸去废液，用PBS洗一遍，再吸弃，加胰酶(含EDTA的)消化，胰酶在瓶子中过一下，使之分布到每个角落中，然后立刻吸弃，将细胞放置于37度孵育1-2分钟，看细胞种类不同和胰酶的活力不同。细胞消化下来后，直接加培养液即可。
这么干4年了，养过的细胞至少有三四十种了，还没有因为消化出过问题。
离心对细胞毕竟有些损伤，并且会丢一些细胞，并增加污染的机会，而且麻烦，要是多养点细胞，该累死了。我最多时养过十来种细胞，五六十瓶，每天还很轻松，要是要离心，累死我，  所以不是很建议。
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hold住[使用道具]
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发表于 2012-11-7 11:21 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
离心，EDTA对细胞不利于贴壁，消化可以不用EDTA
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yonger[使用道具]
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发表于 2012-11-7 11:22 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

需要离心，EDTA影响细胞贴壁过程
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wood533[使用道具]
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发表于 2012-11-7 11:23 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我养细胞的时间不长，离心确实麻烦耗时，而且离心后的细胞状态容易转差。
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