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标题:【求助】神经元培养

qianqin1977[使用道具]
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发表于 2012-11-7 15:11 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】神经元培养

我最近开始培养海马神经元，但是发现背景总是很脏，而且成纤维细胞很多，因为在剥离海马时很难将包绕海马的软脑膜去掉，请问各位有什么办法？多谢！
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yjf1026[使用道具]
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发表于 2012-11-7 15:11 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

背景很脏你可以选择接种细胞后的适当时间(看细胞是否贴壁)以后就给细胞换个液体,这样可以减少背景。用游丝镊子可以将软脑膜、血管组织剔除的相对干净一点的，这需要细心和耐心。
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发表于 2012-11-7 15:13 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

非常感谢！
再问个问题，一般书上都建议半量或2/3换液，以减少对细胞的损害，为了减少背景可否全量换液？
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发表于 2012-11-7 15:17 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
一般来说,对于你是刚接种时间不长的细胞,全部换掉问题不大，可以的。你可以把培养基在37度温一下,减少对细胞的刺激,用同一批培养基问题不大。
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发表于 2012-11-7 15:17 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我马上就要养海马细胞了 可是听说很难养好 请问前辈是用乳鼠（几天之内）还是用孕鼠肚里的胎鼠养啊 还有你们养的细胞状态好吗 够做膜片嵌用吗？ 请前辈多多指教 谢了！
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发表于 2012-11-7 15:18 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
养海马细胞也不是很难，所谓难者不会，会者不难，我们用的是1－3天的新生大鼠，也有文献说用胎鼠好一些，但我们也做过，没发现什么太大的差别。培养的细胞活力很好，我们没做过膜片钳，但我看别人做过，应该没有问题。
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发表于 2012-11-7 15:18 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

有哪位大侠愿意介绍一下海马细胞原代培养的具体步骤，我练习了一段时间发现状态还是不够好，请多多指教 谢了
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IAM007[使用道具]
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发表于 2012-11-7 15:19 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
养海马细胞也不是很难，所谓难者不会，会者不难，我们用的是1－3天的新生大鼠，也有文献说用胎鼠好一些，但我们也做过，没发现什么太大的差别。培养的细胞活力很好，我们没做过膜片钳，但我看别人做过，应该没有问题。

请问别人是用你的海马细胞做的膜片嵌吗
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yes4[使用道具]
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发表于 2012-11-7 15:19 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

那不是，他们是直接消化脑组织得到的细胞，但我想培养的细胞的活力只会比那强，不过纯属个人主观臆断，不足为凭，还得靠实验证实。
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tuuu2[使用道具]
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发表于 2012-11-7 15:20 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我也是正在做海马神经细胞的培养，我的信箱是zht0713@hotmail.com希望多和大家交流一下
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