细胞世界 » 讨论区 » 经验共享 » 【求助】流式检测的最小细胞数量

采购询价

点击提交代表您同意 《用户服务协议》 《隐私政策》

 
需要登录并加入本群才可以回复和发新贴
打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:【求助】流式检测的最小细胞数量

nn255[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76746
精华 0
积分 652
帖子 1024
信誉分 100
可用分 5877
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-9
状态 离线
1

发表于 2012-11-7 19:30 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】流式检测的最小细胞数量


请问流式检测的最小的细胞数量是多少，如果小于一○○○个细胞的话是否就不能采用流式检测了。流式要求的细胞的最小体积是多少，我最近收集了少量细胞团，30-50 微米，因为将细胞团中的各个细胞分离开较难，是否可以用于流式的检测？
顶部
xueyouzhang[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 76770
精华 0
积分 470
帖子 640
信誉分 100
可用分 3996
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-9
状态 离线
2

发表于 2012-11-7 19:30 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
如果不能将细胞分散成单个细胞悬液的话是无法用流式细胞法分析的。
顶部
nn255[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76746
精华 0
积分 652
帖子 1024
信誉分 100
可用分 5877
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-9
状态 离线
3

发表于 2012-11-7 19:31 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
请问流式检测的最小细胞数是多少？如分离出两种细胞，一种细胞数很少，但体积很大，另一种细胞是其数量的10-20倍，是否可以用流式同时检测呢？
顶部
gogo[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 77052
精华 0
积分 821
帖子 1341
信誉分 100
可用分 7487
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-12
状态 离线
4

发表于 2012-11-7 19:31 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

制成细胞悬液，处理仔细，至少10^5左右。至于细胞明显体积不同，应该可以分团显示，但是必须保证没有很多碎片和杂质，不然分团还是很不清楚。
顶部
zsxan1990[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 76272
精华 0
积分 442
帖子 604
信誉分 100
可用分 3776
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-3
状态 离线
5

发表于 2012-11-7 19:32 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
请问流式检测的最小细胞数是多少？如分离出两种细胞，一种细胞数很少，但体积很大，另一种细胞是其数量的10-20倍，是否可以用流式同时检测呢？

————————————————————————————————————————————————————————————————

记得有人研究用针头取样后进行流式分析的文章,所以细胞数应该是可以很少的.在大量细胞中检测低频率事件(即你例子中的第一种细胞)正是流式的优点.关键是你的第一种细胞在大小,密度或荧光标记上和其他大量细胞有区别,并且细胞团能用酶解或机械方法处理成单细胞悬液.
顶部
lixi559[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 73492
精华 0
积分 560
帖子 820
信誉分 100
可用分 4896
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-9-23
状态 离线
6

发表于 2012-11-7 19:32 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
请问流式检测的最小的细胞数量是多少，如果小于一○○○个细胞的话是否就不能采用流式检测了。流式要求的细胞的最小体积是多少，我最近收集了少量细胞团，30-50 微米，因为将细胞团中的各个细胞分离开较难，是否可以用于流式的检测？

————————————————————————————————————————————————

流式检测的最小的细胞数量是10000个细胞。
细胞团部可以作流式，必须制成单细胞悬液，可用400目的细胞筛网过滤细胞团块。在进行流式测定
顶部
huifeng0516[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76210
精华 0
积分 552
帖子 783
信誉分 100
可用分 4731
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-2
状态 离线
7

发表于 2012-11-7 19:33 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

300目就可以吧
10000个只要300ul就可以获取了，其实也不多
顶部
dog002[使用道具]
四级
Rank: 4


UID 76386
精华 0
积分 916
帖子 1452
信誉分 100
可用分 8133
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-11-4
状态 离线
8

发表于 2012-11-7 19:34 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
流式能检测含多种细胞的标本吗?细胞碎片影响流式检测效果吗?怎样在检测前去除细胞碎片?
顶部
standbyme[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 75190
精华 1
积分 365
帖子 405
信誉分 102
可用分 2821
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-10-20
状态 离线
9

发表于 2012-11-7 19:34 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
流式能检测含多种细胞的标本吗?细胞碎片影响流式检测效果吗?怎样在检测前去除细胞碎片?

——————————————————————————————————————————————————————————————

能检测含多种细胞的标本
因为流式本身能根据细胞的大小及细胞内容物颗粒大小(即所谓的流式仪所用的前向光和侧向光)来区别不同的细胞群
而通常做研究时是荧光标记你感兴趣的亚群进行分析
含有碎片会有一点点影响,但用空白样品(未作任何荧光标记的样本)选定你想研究的细胞群体时,即可排除细胞碎片,因为碎片所反映的前向光和侧向光和完整的细胞基本不相同
顶部
standbyme[使用道具]
三级
Rank: 3Rank: 3


UID 75190
精华 1
积分 365
帖子 405
信誉分 102
可用分 2821
专家分 10
阅读权限 255
注册 2011-10-20
状态 离线
10

发表于 2012-11-7 19:35 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
请问流式检测的最小的细胞数量是多少，如果小于一○○○个细胞的话是否就不能采用流式检测了。流式要求的细胞的最小体积是多少，我最近收集了少量细胞团，30-50 微米，因为将细胞团中的各个细胞分离开较难，是否可以用于流式的检测？

————————————————————————————————————————————————————————————————

检测时最少要有2000个细胞
但最初准备样品时,如果只做外标,样品比最少细胞数大一个数量级即可;但要是需要作内标的话,固定液和穿膜液粘度大,细胞损失也多,而且,穿膜液一般对细胞还有损伤,故样品细胞数要比最少细胞数大2个数量级!
做流式,细胞必须是单细胞悬液,成团细胞可用胰酶处理,或是在细胞样品中加2mM的EDTA,防螯合
顶部