小中大我想应该考虑好这么几个问题：
1、96孔放200uL的液体是完全可以的，而且在相同细胞数的情况下，可以延迟换液时间。100和200不是固定的只要你每孔的细胞数和你的重离子浓度不变就可以了。一定要换液时，可以用枪，一个一个慢慢吸取，注意枪尖轻触培养版底即可。排枪也可以，个人以为不如一个一个孔吸得干净彻底。
2、不知道你的重金属离子需要作用的时间时多长。如果再你换液时间之内比如一天，那么换液时就不存在离子浓度改变的问题；大家作用时间都满足要求了，换液只是为了培养时间的需要。
如果是持续作用，那么我想你换液时，可以按照原来的浓度梯度在培养基里重新加入重离子达到你需要的浓度，继续培养。这时候大家的处理因素一致，我想可以说明问题。但是，如你所说这个时候，离子浓度相对于细胞数已经发生了变化，到底对你的实验结果有没有影响，需不需要考虑，要根据你的实验确定。我想很难把这种因素完全去掉。
3、cck-8相比于mtt等优点之一就是在干预因素作用后，可以直接加入，省去其他繁琐的步骤。除非你的培养基处理后本身颜色变化过于强烈，本人觉得可以不用换液。
