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标题:【讨论帖】细胞生物学实验的镜检标本制备必须...

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发表于 2012-12-4 11:25 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【讨论帖】细胞生物学实验的镜检标本制备必须...

细胞生物学实验的镜检标本制备必须取材新鲜且迅速固定，为什么？透射电镜观察的样品为什么必须事前进行脱水处理？


如题
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发表于 2012-12-4 11:26 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大


QUOTE:
原帖由 kent 于 2012-12-4 11:26 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')
不光是细胞生物学，绝大多数生物学研究都需要尽快制备标本，以免细胞结构或成分发生变化。

不光是透射电镜样品需要脱水，石蜡切片也是一样的，否则无法包埋和切片，因为包埋剂一般是脂溶性的，只不过石蜡切片用石蜡包埋，电镜标 ...

问题是为什么要这样做呢？谢谢
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发表于 2012-12-4 11:26 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
细胞生物学实验的镜检标本制备必须取材新鲜且迅速固定

还有酶的原因。
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发表于 2012-12-4 11:27 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
这个是考研真题，系统的回答应该答上哪些要点呢？
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发表于 2012-12-4 11:27 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
这个问题我问过我们老师了，老师的回答是这样的：

因为离体的细胞处在很低的大气压中，膜结构很不稳定，时间长了之后会导致膜结构破坏，整个细胞就支离破碎了。
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发表于 2012-12-4 11:28 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
您所说的离体的细胞也是要有环境的吧，什么培养液之类的东西应该是要的吧，但是要镜检的话，在载玻片这些条件都是不存在的啊，所以要迅速固定啊！

您说呢？
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发表于 2012-12-4 11:29 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
觉得楼上两位说的有些差开了。

这两个问题还是不同的。分开解释比较好。
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发表于 2012-12-4 11:30 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我觉得主要还是防止酶的自溶作用。


以前写试验方案时整理的关于固定的资料：

固定的目的：

更好的保持细胞原有的形态结构；
多数蛋白为水溶性，固定可使细胞内蛋白质凝固，防止抗原弥散；
终止或抑制外源性和内源性酶活性；
最大限度的保存细胞的抗原性。
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发表于 2012-12-4 11:33 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
在老师给我们的课后联系题上也有这个题，是在第六章，内质网和高尔基那一章里，我想，难道这只是一个纯粹实验的问题吗？那为什么老师会在这一章的练习题中给出呢？
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发表于 2012-12-4 11:33 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
样品取材的基本要求
⑴　快　取材的动作要迅速，最好在材料离体后１min内就进入固定液；解剖器械要锋利，避免牵拉和挤压，尽量减少取材中的机械损伤。
⑵　准　取材要准确。①　器官要准确　②　部位要准确：如脑垂体的前叶和后叶要分清，其结构和功能各不相同。
⑶　冷　取材过程应尽量在低温下进行（０～４℃），以降低酶的活性，减少细胞内结构的损失。
⑷　小　所取材料体积要小，一般不超过１㎜3。因为固定剂的渗透力较弱，若组织块太大，块的内部将得不到良好的固定。
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