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标题:【求助】自噬抑制剂3-MA如何配制,保存

bgf5[使用道具]
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发表于 2012-12-27 12:48 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】自噬抑制剂3-MA如何配制,保存

购买的SIGMA的试剂，我打算用PBS溶解，但不知道是否要过滤除菌。还有配好后如何保存呢？
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987789[使用道具]
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发表于 2012-12-27 12:48 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我也是刚刚接触这个试剂的，一开始是从别的地方借来的做预实验。接下来就要买的。但是我的二导是做自嗜的。她告诉我说是5M的浓度储存，5mM的浓度使用浓度，用PBS稀释。但是我们借过来的药物浓度时335mM的，估计还是看你自己的意思吧。还有就是这个药在高浓度的时候是很容易凝固的，遇冷就凝成块状，不好加药。所以提前做好准备。
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发表于 2012-12-27 12:48 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

你好 你用3-MA做预实验的时候，是不是要提前预处理细胞？还是不用预处理就作用几个小时就可以？
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bamboo16[使用道具]
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发表于 2012-12-27 12:49 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我也是刚刚接触这个试剂的，一开始是从别的地方借来的做预实验。接下来就要买的。但是我的二导是做自嗜的。她告诉我说是5M的浓度储存，5mM的浓度使用浓度，用PBS稀释。但是我们借过来的药物浓度时335mM的，估计还是看你自己的意思吧。还有就是这个药在高浓度的时候是很容易凝固的，遇冷就凝成块状，不好加药。所以提前做好准备。

你好，你5M储存在常温还是4度呀？说明书上写的是水溶呀，你是用水溶的还是PBS呀？我能配成200mM储存可以的吧
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yueban-1147[使用道具]
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发表于 2012-12-27 12:49 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

3-MA最简单的溶解方法：0.015g溶于10ml培养基，37度培养箱放置2小时，即能溶解；一般现配现用，如果溶液状态4度放置可以一月。
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我佛慈悲[使用道具]
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发表于 2012-12-27 12:50 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大
我也是刚刚接触这个试剂的，一开始是从别的地方借来的做预实验。接下来就要买的。但是我的二导是做自嗜的。她告诉我说是5M的浓度储存，5mM的浓度使用浓度，用PBS稀释。但是我们借过来的药物浓度时335mM的，估计还是看你自己的意思吧。还有就是这个药在高浓度的时候是很容易凝固的，遇冷就凝成块状，不好加药。所以提前做好准备。

++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++

您好，请教您个问题：3-MA应该怎样使用？我是做细胞实验的，加药前用3-MA预处理1-2h，处理完后加药时是把3-MA去掉呢还是继续保留？还是有其他处理方法？最近一直在纠结这个问题，请赐教!
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birdfish[使用道具]
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发表于 2012-12-27 12:51 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

我是直接用水配的，0.1M保存，用的时候预热到50度，工作浓度是5uM。 我是做心肌细胞的，可是加了3-MA之后，LC3-II/LC3-I反而增多了，不明白。 有人能解释下吗
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birdfish[使用道具]
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发表于 2012-12-27 12:51 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

是5mM的工作浓度，配成0.2M母液保存。
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mimili_901[使用道具]
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发表于 2012-12-27 12:52 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

最近刚补了3-MA抑制实验，250uM 3-MA预处理293T1.5h,继续作用48h，50uMCQ作用6h,望战友们参考
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发表于 2012-12-27 12:52 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

溶解于PBS即可，最好不要用DMSO。
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