【讨论帖】caco-2培养问题

细胞世界 » 讨论区 » 经验共享 » 【讨论帖】caco-2培养问题

32 1/4 1 2 3 4 ››

需要登录并加入本群才可以回复和发新贴

打印 | 推荐 | 订阅 | 收藏

标题:【讨论帖】caco-2培养问题

冰岛老叟[使用道具]
三级
Rank: 3

UID 75135
精华 0
积分 168
帖子 76
信誉分 100
可用分 1121
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-19
状态离线

发表于 2012-12-29 10:58 资料个人空间短消息加为好友

小中大

相关疾病：
结肠癌
各位大侠想请教下我该怎么做结肠癌caco-2细胞我用20%DMEM养着长得倒不慢但是不知道为什么每次分瓶贴壁的就很少有过很久才能长起来！是不是残留的胰酶有影响呢！！？

hold住[使用道具]
四级
Rank: 4

UID 75093
精华 0
积分 566
帖子 832
信誉分 100
可用分 4962
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-19
状态离线

发表于 2012-12-29 10:58 资料个人空间短消息加为好友

小中大

这株细胞生长很快的，用不着20%的血清，在我们实验室用的是MEM+10%FBS,大概两天就能传一代。残留一点点胰酶不会有太大影响的。是不是操作过于粗暴细胞都死掉了，或者是血清不好不易贴壁。

冰岛老叟[使用道具]
三级
Rank: 3

UID 75135
精华 0
积分 168
帖子 76
信誉分 100
可用分 1121
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-19
状态离线

发表于 2012-12-29 11:12 资料个人空间短消息加为好友

小中大

QUOTE:

原帖由 hold住 于 2012-12-29 10:58 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

这株细胞生长很快的，用不着20%的血清，在我们实验室用的是MEM+10%FBS,大概两天就能传一代。残留一点点胰酶不会有太大影响的。是不是操作过于粗暴细胞都死掉了，或者是血清不好不易贴壁。 ...

因为是新来的细胞，操作挺小心的，他们那边就是用20%养所以也一直没变，会不会是血清浓度太高咋的!！？血清就是一般的啊，好血清嘛咱有点负担不起~~~
是不是我离心把人家离死了，您养这株细胞分瓶的时候离心吗？？

hold住[使用道具]
四级
Rank: 4

UID 75093
精华 0
积分 566
帖子 832
信誉分 100
可用分 4962
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-19
状态离线

发表于 2012-12-29 11:15 资料个人空间短消息加为好友

小中大

没离心，直接弃培养基加消化液，观察要下来了，弃去大量消化液，然后等全消化下来了，加培养基分瓶。

冰岛老叟[使用道具]
三级
Rank: 3

UID 75135
精华 0
积分 168
帖子 76
信誉分 100
可用分 1121
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-19
状态离线

发表于 2012-12-29 11:15 资料个人空间短消息加为好友

小中大

用10%DMEM完全够它了哈，好的我懂了，谢谢了！

冰岛老叟[使用道具]
三级
Rank: 3

UID 75135
精华 0
积分 168
帖子 76
信誉分 100
可用分 1121
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-19
状态离线

发表于 2012-12-29 11:16 资料个人空间短消息加为好友

小中大

因为是新来的细胞，操作挺小心的，他们那边就是用20%养所以也一直没变，会不会是血清浓度太高咋的!！？血清就是一般的啊，好血清嘛咱有点负担不起~~~
是不是我离心把人家离死了，您养这株细胞分瓶的时候离心吗？？

++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++++

大侠，还想问一个，这个caco2肿么总是一团一团聚在一起长，不铺满培养瓶呢，而且细胞又大，肉眼都能看到瓶子里这一点那一点的细胞团，你的也是这样吗？

yueban-1147[使用道具]
四级
Rank: 4

UID 75776
精华 0
积分 692
帖子 1064
信誉分 100
可用分 6113
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-27
状态离线

发表于 2012-12-29 11:16 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我的Caco-2养得情况和你差不多，时好时坏，状态不好的时候较容易抱团以及分泌脏东西，郁闷啊

冰岛老叟[使用道具]
三级
Rank: 3

UID 75135
精华 0
积分 168
帖子 76
信誉分 100
可用分 1121
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-19
状态离线

发表于 2012-12-29 11:17 资料个人空间短消息加为好友

小中大

我的Caco-2养得情况和你差不多，时好时坏，状态不好的时候较容易抱团以及分泌脏东西，郁闷啊

=============================================================================================================

是我现在基本接受了它这个德性了我就每次吹打往死里吹散，结果长得较分散，虽然长得慢点，不过渐渐均匀起来！你可知道这个细胞冻存最好是什么比例呢？有些比例确实不适合细胞复苏，比如我的SW480用7：2：1就有点难活！

vivian4123[使用道具]
三级
Rank: 3

UID 75243
精华 0
积分 417
帖子 494
信誉分 100
可用分 3331
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-20
状态离线

发表于 2012-12-29 11:17 资料个人空间短消息加为好友

小中大

你可以用太牛血清：DMSO=9：1比例冻存试一下，不过这个细胞好难复苏，我用了很多方法，都没有一个比较好复苏成功的。

冰岛老叟[使用道具]
三级
Rank: 3

UID 75135
精华 0
积分 168
帖子 76
信誉分 100
可用分 1121
专家分 0
阅读权限 255
注册 2011-10-19
状态离线

发表于 2012-12-29 11:18 资料个人空间短消息加为好友

小中大

QUOTE:

原帖由 vivian4123 于 2012-12-29 11:17 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '%s')

你可以用太牛血清：DMSO=9：1比例冻存试一下，不过这个细胞好难复苏，我用了很多方法，都没有一个比较好复苏成功的。

试过这个没好像蛮专业的：基础培养基+5%DMSO+20%FBS

32 1/4 1 2 3 4 ››