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标题:【求助】细胞大面积脱落,困扰很久了

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【求助】细胞大面积脱落,困扰很久了

我养的是原代的在位和异位的子宫内膜细胞。最近细胞一直出现大面积脱落死亡的现象。
不论是原代新种的细胞还是复苏的以及传代的细胞。把所有的试剂耗材都换了,还是一直脱。求助各位战友!
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这个是实拍的细胞脱的碎片,这是不太严重的,严重的时候可以看到整片的膜状物飘在培养皿上。换液之后要么很快就变黄,要么培养基一直不变色。


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这个是光镜下的,这是刚复苏刚开始脱片的时候的样子。既能看到细胞,又能看到碎屑。


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这个是光镜下的,这是刚复苏刚开始脱片的时候的样子。既能看到细胞,又能看到碎屑。


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这两张是倒置显微镜下拍的,团状的就是成团的碎屑。

这是脱片的膜状边缘,高倍镜下看不到菌丝什么的。就是膜。


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6
 
现在发一些原代细胞的脱片照片。


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7
 
基本状态跟复苏的很像,有时候是碎屑样的脱落,严重的也是膜一样的脱落。


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8
 
这是原代在位的子宫内膜间质细胞的倒置镜下的图片。


这是异位的原代异位内膜倒置镜下的照片。。


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9
 
一个月前曾经出现过复苏细胞成片脱落的现象,发现是复苏时候被污染了,注意之后就没有再出现过这种问题。
这次情况很严重了,开始以为是细胞状态不好,后来找了状态好的的P1代的细胞,更换了所有的培养基和材料,还是不行。而且原代也出现了这样的问题。之前原代细胞和传代的时候从来不会出现这样大面积脱落。
求助各位高手,各位战友!快愁死了……
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培养基的营养是不是不足了?就是原来培养基和更换的培养基是不是过期、保存不当等情况有存在?
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